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PI3K-AKT信号在CD40分子调节肺癌细胞侵袭能力中的作用

Role of P13K-AKT signaling pathway in CD40-mediated proliferation and invasiveness of lung cancer cell

摘要:

目的 分析CD40分子活化对肺癌细胞株H1299体外增殖、侵袭能力的影响,探讨磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-AKT)信号途径在上述过程中的作用.方法 细胞计数方法-8(CCK-8)检测CD40分子活化对H1299细胞的增殖效应;划痕实验、Transwell小室模型分析CD40分子活化对H1299细胞侵袭能力的影响;Western印迹检测CD40激发对H1299细胞磷酸化的PI3KAKT蛋白表达的调节;酶联免疫吸附(ELISA)法测定CD40对H1299细胞分泌基质金属蛋白酶9(MMP-9)的变化.结果 CCK-8法示5C11组细胞在不同时间其吸光度(A)值均明显提高,在96 h时10.0 mg/L浓度5C11组(2.75±0.35)显著高于对照组(1.72±0.18) (P <0.05);划痕实验示24 h后5C11组划痕宽度均明显减少,10.0 mg/L浓度5C11组划痕宽度为(0.05±0.01) mm,缩短最明显,与对照组的(1.62±0.32) mm相比,差异有统计学意义(P<0.05);Western印迹示:5C11激发H1299细胞10 min后磷酸化AKT蛋白开始增加,30 min时非常显著,p-AKT表达(0.65±0.28)与初始状态表达(0.33±0.16)相比,差异有统计学意义(P<0.05),加入LY294002后,p-AKT水平受到抑制;侵袭实验示5C11组穿过微孔贴于下室的细胞数(168±31)比对照组(105±19)明显增多,差异有统计学意义(P<0.05),5C11+LY294002组下室细胞数(118±21)与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);ELISA检测示5C11组MMP-9浓度为(192±31)ng/L,与对照组的(110±23) ng/L相比,差异有统计学意义(P<0.05),5C 11+ LY294002组MMP-9浓度为(120±21)ng/L,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论 CD40分子活化对肺癌细胞H1299具有促进体外增殖、侵袭能力,其机制部分在于CD40分子激发介导的PI3K-AKT信号活化.

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