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白藜芦醇对过氧化氢氧化应激损伤人脐静脉血管内皮细胞的保护作用

Resveratrol protects against hydrogen peroxide induced injury in human umbilical vein endothelial cells

摘要:

目的 观察白藜芦醇对过氧化氢氧化应激损伤人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的保护作用.方法 实验分为5组:对照组、过氧化氢组、过氧化氢+白藜芦醇组、过氧化氢+白藜芦醇+LY294002组、过氧化氢+LY294002组,用细胞增殖检测试剂盒(cck-8法)检测细胞存活率;用丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测MDA和SOD的产生;用流式细胞术检测HUVEC细胞内活性氧类物质(ROS)的水平;用蛋白印迹(Westem blot)法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)等蛋白的磷酸化水平.结果 与对照组相比,实验浓度的白藜芦醇明显提高受氧化应激的HUVEC细胞存活率(36.14 ±2.20)升至(72.05±2.46)(P=0.004),增加SOD产生率(35.61±3.26)升至(81.37 ±4.55) (P =0.007),降低细胞内MDA生成率(299.38±12.42)降至(159.17±7.30) (P=0.006),减少ROS生成率(177.86 ±8.98)降至(133.96 ±4.17) (P=0.003),并且有效活化p-Nrf2(198.57±6.89)升至(371.10±8.41) (P=0.005)、p-Akt(102.93±3.29)升至(221.62 ±6.51) (P =0.004)、p-mTOR(93.26±4.12)升至(172.14 ±5.74) (P =0.008)蛋白表达.用PI3 K/Akt通路阻断剂LY294002后,白藜芦醇的抗氧化应激作用和对相关蛋白的活化作用均出现不同程度的减弱和下调.结论 实验剂量的白藜芦醇可以对氧化应激损伤的HUVEC发挥保护作用,其机制可能与活化PI3 K-Akt-mTOR通路有关.

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