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叶酸修饰的载质粒磁性纳米复合物靶向鼻咽癌的基因转染作用

Gene transfection of magnetic nanocomposite loading plasmid modified by folic acid targeted to nasopharyngeal carcinoma

摘要:

目的 探讨偶联叶酸(FA)的载质粒PEG-PEI(-FA)-Alg-氧化铁磁性纳米复合物对叶酸受体(FR)阳性鼻咽癌(NPC)细胞的分子靶向能力及基因转染效率.方法 体外实验采用铁染色和透射电镜方法观察FR阳性NPC细胞HNE-1及FR阴性NPC细胞CNE-2吞噬磁性纳米复合物的情况,并通过观察两种细胞内质粒绿色荧光蛋白(GFP)表达及流式细胞仪分析该磁性纳米复合物的基因转染效率;体内实验采用MRI、铁染色及透射电镜观察尾静脉注射磁性纳米复合物后,同时荷HNE-1及CNE-2两种瘤的同一裸鼠种植瘤细胞吞噬磁性纳米复合物的情况.结果 体外实验显示,HNE-1细胞能有效摄取磁性纳米复合物,细胞内见较强GFP表达,基因转染效率为40.0%±3.0%.而CNE-2细胞不能有效摄取磁性纳米复合物,细胞内仅见很少量的GFP表达,基因转染效率为4.5%±1.5%.体内实验显示,HNE-1种植瘤细胞能有效的吞噬磁性纳米复合物,而CNE-2种植瘤内吞噬的磁性纳米复合物很少.结论 偶联FA的载质粒PEG-PEI (-FA)-Alg-氧化铁磁性纳米复合物具有良好的分子靶向性及较高的基因转染效率.

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abstracts:

Objective To evaluate the molecular targeting capacity and gene transfection efficiency of magnetic nanocomposite coupling with folic acid (FA) of PEG-PEI(-FA)-Alg-Fe3O4 adsorbing plasmid to folate receptor (FR) positive nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell.Methods The phagocytosis of magnetic nanocomposite was examined in FR positive NPC HNE-1 and FR negative NPC CNE-2 cells.Prussian blue staining,transmission electron microscope (TEM) and flow cytometry were employed to analyze its gene transfection efficiency by observing the plasmid expression of green fluorescent protein (GFP) in two cell types.Nude mice with implanted HNE-1 and CNE-2 tumor received a tail vein injection of magnetic nanocomposite.And the phagocytosis of magnetic nanocomposite was observed by magnetic resonance imaging (MRI),iron staining and TEM.Results HNE-1 cell could effectively ingest magnetic nanocomposite,there was a strong intracellular expression of GFP and the gene transfection efficiency was approximately 40.0% ± 3.0%.However,CNE-2 cell had virtually no uptake of magnetic nanocomposite,there was a weak intracellular expression of GFP and the gene transfection efficiency was approximately 4.5% ± 1.5%.The implanted HNE-1 tumor cell could efficiently swallow magnetic nanocomposite,but there was little phagocytosis of magnetic nanocomposite in implanted CNE-2 tumor cell.Conclusion The magnetic nanocomposite coupling with FA of PEG-PEI (-FA)-Alg-Fe3Oa adsorbing plasmid has excellent molecular targeting capacity and higher gene transfection efficiency.

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作者: 刘涛 [1] 马栋 [1] 柯波 [1] 谢民强 [1]
期刊: 《中华医学杂志》2014年94卷10期 772-775页 MEDLINEISTICPKUCSCD
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.10.014
发布时间: 2014-04-24
基金项目:
国家自然科学基金 教育部高等学校博士学科点专项科研基金 江西省科技厅社会发展科技支撑计划
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