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CD40对烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8+T细胞毒性功能的影响

Effect of CD40 knock out on cytotoxic effector function in CD8 + T cell of mice with cigarette smoke-induced emphysema

摘要:

目的 探讨CD40对烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8+T细胞毒性功能的影响.方法 40只雄性C57小鼠按随机数字表法随机分为CI40+/+对照组、CD40+/+烟熏组、CD40-/-对照组、CD40-/-烟熏组4组,烟熏组采用烟草烟雾暴露24周建立小鼠肺气肿模型.各组肺组织分别采用HE染色观察肺部病理改变并计算肺泡平均内衬间隔;免疫组织化学法检测CD8+T细胞和穿孔素+、颗粒酶B+细胞百分比;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测穿孔素、颗粒酶B、白细胞介素(IL)-27mRNA表达;酶联免疫吸附(ELISA)法检测IL-27细胞因子水平.结果 CD40+/+烟熏组肺组织明显破坏,可见大量炎症细胞浸润;CD40-/-烟熏组肺组织破坏及炎症细胞浸润程度较CD40+/+烟熏组轻.CD40+/+烟熏组肺泡平均内衬间隔显著高于CD40+/+对照组、CD40-/-对照组和CD40-/-烟熏组[(37.2±3.6)比(24.0±3.4)、(22.5±2.4)、(29.9±1.7) μm](均P<0.05);CD40-/-烟熏组高于CD40+/+对照组及CD40-/-对照组(均P<0.05).CD40+/+烟熏组CD8+、穿孔素+、颗粒酶B+细胞百分比[(16.3±2.3)%、(11.4±2.1)%、(10.7±1.9)%]均显著高于CD40+/+对照组[(8.3±1.6)%、(5.1±1.2)%、(4.6±1.0)%]、CD40-/-对照组[(6.4±1.5)%、(4.3±1.0)%、(4.2±1.0)%]、CD40-/-烟熏组[(8.6±1.7)%、(5.6±1.3)%、(5.5±1.3)%](均P<0.05).CD40+/+烟熏组穿孔素、颗粒酶B、IL-27 mRNA相对表达量[(20.3±7.3)、(18.3±12.3)、(2.2±0.7)]均显著高于CD40+/+对照组[(9.4±4.8)、(10.6±3.8)、(1.3±0.6)]、CD40-/-对照组[(8.1±3.1)、(7.7±3.5)、(1.1±0.5)]、CI40-/-烟熏组[(12.9±6.2)、(10.4±4.6)、(1.5±0.4)](均P<0.05).CI40+/+烟熏组细胞因子IL-27水平显著高于CID40+/+对照组、CD40-/-对照组、CD40-/-烟熏组[(3 242 ±754)比(1 627 ±710)、(1 600±680)、(1 850±583)ng/L](均P<0.05).结论 CD40基因敲除可以抑制烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8+T细胞毒性功能,减轻肺气肿程度.

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