高尔基体蛋白73在肝细胞癌转移及侵袭中的作用

Depletion of GP73 inhibits invasion and metastasis of hepatocellular carcinoma cells

摘要:

目的 探讨高尔基体蛋白73(GP73)在肝癌细胞增殖、转移和小鼠肿瘤形成中的作用.方法 应用pX459-GP73-sgRNA重组质粒转染HepG2和H22肝癌细胞,通过筛选获得敲除GP73的细胞株.采用Western blot检测GP73在HepG2和H22细胞中的表达,采用平板克隆形成实验检测GP73对细胞生长能力的影响,采用流式细胞仪检测G2/M期细胞比例,采用Transwell实验检测GP73对细胞侵袭能力的影响,采用皮下种植实验检测GP73对H22细胞肿瘤形成能力的影响.结果 经嘌呤霉素筛选获得稳定敲除GP73蛋白的H22和HepG2细胞.GP73敲除10 d后,HepG2细胞GP73-sgRNA转染组的细胞克隆数[(400±70)个]少于阴性对照组[(980±40)个];H22细胞GP73-sgRNA转染组的细胞克隆数[(248±60)个]少于阴性对照组[(1 100±50)个],差异均有统计学意义(均P<0.01).敲除GP73蛋白后,细胞周期进程减慢.Transwell迁移实验中,HepG2细胞GP73-sgRNA转染组和阴性对照组的穿膜细胞数分别为(312±50)个和(1 540±87)个;H22细胞GP73-sgRNA转染组和阴性对照组的穿膜细胞数分别为(305±49)个和(1 270±86)个,差异均有统计学意义(均P<0.01).侵袭实验中,HepG2细胞GP73-sgRNA转染组和阴性对照组的穿膜细胞数分别为(230±47)个和(648±74)个;H22细胞GP73-sgRNA转染组和阴性对照组的穿膜细胞数分别为(238±54)个和(596±63)个,差异均有统计学意义(均P<0.01).GP73敲除后,小鼠的肿瘤体积为(570±170)mm3,小于对照组[(1 200±110)mm3,P<0.01].结论 敲除GP73蛋白能减弱H22和HepG2肝癌细胞的侵袭和迁移能力,GP73的表达可能与肿瘤侵袭、增殖和转移有关.

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作者: 刘丽萍 [1] 陈健康 [1] 刘元明 [1] 张丹浩 [1] 张景 [1] 杨晓莉 [1]
期刊: 《中华肿瘤杂志》2017年39卷7期 497-501页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2017.07.004
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