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骨髓基质细胞对急性淋巴细胞白血病细胞化疗敏感性的影响

Effects of bone marrow stromal cells on the chemotherapeutic sensitivity of acute lymphoblastic leukemia cells

摘要:

目的 探讨骨髓基质细胞及其细胞外基质成分和基质细胞因子对急性淋巴细胞白血病细胞Sup-B15阿糖胞苷(Ara-C)化疗敏感性的影响.方法 构建急性淋巴细胞白血病细胞Sup-B15与骨髓基质细胞OP9共培养模型.将Sup-B15细胞分为Sup-B15与OP9共培养组、Sup-B15与灭活的OP9共培养组、Sup-B15单独培养组、Sup-B15与OP9共培养液组、OP9单独培养液组和Sup-B15单独培养液组.采用细胞计数盒8法观察不同浓度的Ara-C对各组Sup-B15细胞增殖活力的影响;采用流式细胞仪检测Ara-C对各组Sup-B15细胞凋亡的影响;采用Western blot法检测各组Sup-B15细胞中bcl-2蛋白的表达情况.结果 CCK-8法检测结果显示,随着Ara-C浓度的增加,Ara-C对Sup-B15细胞的抑制率也随之增强.不同浓度Ara-C处理各组Sup-B15细胞48 h,Sup-B15与OP9共培养组、Sup-B15与灭活的OP9共培养组的IC50分别为0.510和0.339μg/ml,均明显高于Sup-B15单独培养组的IC50(0.091μg/ml,P<0.05).Sup-B15与OP9共培养液组的IC50为0.204μg/ml,明显高于OP9单独培养液组(0.087μg/ml,P<0.05)和Sup-B15单独培养液组的IC50值(0.097μg/ml,P<0.05).流式细胞仪检测结果显示,0.1μg/ml Ara-C处理各组Sup-B15细胞24 h后,Sup-B15与OP9共培养组、Sup-B15与灭活的OP9共培养组、Sup-B15单独培养组的早期凋亡细胞百分数分别为(6.67±2.19)%、(8.95±3.04)%和(20.46±2.63)%,Sup-B15与OP9共培养组、Sup-B15与灭活的OP9共培养组的早期凋亡细胞百分数均明显低于Sup-B15单独培养组,差异有统计学意义(P<0.05).Sup-B15与OP9共培养液组、OP9单独培养液组和Sup-B15单独培养液组的早期凋亡细胞百分数分别为(11.16±2.97)%、(22.08±2.71)%和(19.25±1.57)%,Sup-B15与OP9共培养液组的早期凋亡细胞百分数明显低于Sup-B15单独培养液组,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot法检测结果显示,Sup-B15单独培养组、Sup-B15与OP9共培养组、Sup-B15与灭活的OP9共培养组、Sup-B15与OP9共培养液组、OP9单独培养液组和Sup-B15单独培养液组Sup-B15细胞中bcl-2蛋白的相对表达量分别为1.00±0.00、1.53±0.03、1.38±0.01、1.26±0.05、1.03±0.01和0.98±0.02,Sup-B15与OP9共培养组、Sup-B15与灭活的OP9共培养组Sup-B15细胞中bcl-2蛋白表达量均高于Sup-B15单独培养组(P<0.05);Sup-B15与OP9共培养液组Sup-B15细胞中bcl-2蛋白的表达量明显高于Sup-B15单独培养液组(P<0.05),而OP9单独培养液组与Sup-B15单独培养液组的差异无统计学意义(P>0.05).结论 骨髓基质细胞OP9及其细胞外基质成分和基质细胞因子等骨髓微环境成分参与诱导了Sup-B15细胞对Ara-C的化疗抵抗.

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