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肿瘤相关巨噬细胞分泌的抗菌肽cathelicidin促进小鼠结直肠癌生长的作用及机制

Effect and mechanism of antimicrobial peptide cathelicidin secreted by tumor associated ma crophage on the growth of colorectal cancer in mice

摘要:

目的 研究肿瘤相关巨噬细胞分泌的抗菌肽cathelicidin 促进小鼠结直肠癌生长的作用及机制.方法 通过氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(AOM/DSS)方法建立小鼠肠炎相关的结直肠癌模型.对诱导成瘤的小鼠,同时每隔3 d注射1次小鼠cathelicidin中和抗体、IgG抗体(阳性对照)和PBS(阴性对照),持续1个月,取小鼠结肠,拍照、计数肿瘤数目并进行评价.利用实时荧光定量PCR和 Western blot法检测小鼠结肠肿瘤组织、非肿瘤组织以及组织中巨噬细胞cathelicidin 的表达;采用免疫组化法检测小鼠结肠肿瘤组织与非肿瘤组织中的cathelicidin、肿瘤增殖抗原Ki-67和CD68的表达;采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测小鼠结肠肿瘤组织中细胞的凋亡情况.结果cathelicidin在小鼠结肠肿瘤组织的炎症免疫细胞(巨噬细胞)中呈高表达状态,而在肿瘤细胞中表达较弱.注射cathelicidin中和抗体组小鼠的肿瘤数目和长径分别为(4.50±1.18)个和(1.74±0.18)mm,明显低于注射PBS组小鼠的肿瘤数目[(13.88±1.98)个,P<0.01]和肿瘤长径[(3.74±0.38)mm,P<0.01];也明显低于注射IgG抗体小鼠的肿瘤数目[(15.25±1.82)个,P<0.01]和肿瘤长径[(3.40± 0.36)mm,P<0.01].注射cathelicidin中和抗体组肿瘤组织中Ki-67阳性肿瘤细胞百分比为(28.20± 3.44)%,低于注射PBS组[(68.20±3.51)%,P<0.01]和注射IgG抗体组[(69.20±3.41)%,P<0.01].免疫组织化学染色检测结果显示,注射cathelicidin 中和抗体组小鼠组织中CD68的表达明显低于注射IgG抗体组和注射PBS组.TUNEL染色显示,注射cathelicidin中和抗体对肿瘤细胞的凋亡影响不大.结论 肿瘤相关巨噬细胞分泌的 cathelicidin 具有促进小鼠结直肠癌增殖的作用,中和cathelicidin 的表达可以抑制结直肠癌的生长和增殖.cathelicidin通过募集炎症细胞(巨噬细胞)进入肿瘤微环境可能是其促进结直肠癌增殖的主要作用机制.

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