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γδT细胞体外扩增方法的建立及其抗肿瘤活性

Establishment of the culture system of γδ T cells in vitro and the anti-tumor effect

摘要:

目的 探讨建立体外培养γδ T细胞的方法及其体内外抗肿瘤活性及安全性.方法 应用植物血凝素、唑来膦酸、白细胞介素2(IL-2)和IL-7等刺激外周血单个核细胞,在体外进行大量扩增.采用流式细胞术、体外杀伤实验和荷人肺癌小鼠模型检测γδ T细胞的特点和抗肿瘤活性,采用病毒检测试剂盒检测γδ T细胞中外源性因子的污染情况.结果 体外培养14~16 d后,γδ T细胞扩增总数>1.0×1010个,其中CD3+γδ TCR+细胞所占比例>90%,无细菌、真菌、支原体和病毒因子等污染.体外扩增后的γδ T细胞对肺鳞癌细胞SK-MES-1、卵巢癌细胞Ho8910、肺腺癌细胞A549和慢性髓原白血病细胞K562均具有较强的细胞毒性,杀伤效率均>65%(效靶比为50 : 1).实验组和对照组小鼠的肿瘤体积分别为(828.99 ± 61.05)mm3和(1723.51 ± 84.30)mm3,差异有统计学意义(P<0.05).输注γδ T细胞的小鼠无急性不良反应.结论 培养的γδ T细胞具有足够的数量、高纯度、较强的活性、良好的体内外抗肿瘤活性及安全性,对肺癌、卵巢癌和白血病肿瘤细胞具有杀伤活性.

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