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叉头转录因子O亚族6对结直肠癌细胞增殖和侵袭能力的作用

Effects of FoxO6 on proliferation and invasion of colorectal cancer cells

摘要:

目的:探讨叉头转录因子O亚族6(FoxO6)对结肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其分子机制。方法:将FoxO6 siRNA转染结直肠癌细胞HCT116和SW480,干扰FoxO6表达。构建过表达载体pcDNA.3.1-c-Myc,转染FoxO6沉默的HCT116和SW480细胞,过表达c-Myc。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot法检测HCT116和SW480细胞中FoxO6、c-Myc、p21的mRNA和蛋白表达量,溴脱氧尿苷(BrdU)法检测细胞增殖能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。将FoxO6 shRNA慢病毒(LV-FoxO6)转染的SW480细胞注射至BAL b/c裸鼠右侧腋窝皮下构建荷瘤模型,注射后第10、13、16、19、22、25天测量瘤体体积。结果:正常结肠细胞FHC、结肠癌细胞系HCT116和SW480中FoxO6的mRNA表达水平分别为0.91±0.04、1.72±0.07和2.03±0.06,蛋白表达水平分别为0.7±0.04、1.35±0.08和1.56±0.07,结肠癌细胞系HCT116和SW480中FoxO6的mRNA和蛋白表达水平均高于FHC细胞(均 P<0.05)。转染FoxO6 siRNA后,HCT116和SW480细胞中FoxO6 mRNA和蛋白表达均降低(均 P<0.05),细胞增殖能力降低(吸光度分别为0.26±0.07和0.27±0.06,均 P<0.05),侵袭能力下降[侵袭细胞数分别为(42.3±3.3)个和(45.7±4.1)个,均 P<0.05],c-Myc的mRNA和蛋白表达量降低(均 P<0.01),p21的mRNA和蛋白表达量升高(均 P<0.01)。转染pcDNA.3.1-c-Myc到FoxO6沉默的HCT116和SW480细胞后,p21表达量减少,细胞增殖能力增强(吸光度分别为0.54±0.09和0.58±0.07,均 P<0.01),侵袭能力增强[侵袭细胞数分别为(79.2±5.9)个和(80.5±6.4)个,均 P<0.01]。裸鼠接种细胞后第25天,LV-FoxO6-SW480组的肿瘤体积为(190.6±36.2)mm 3,明显低于SW480组[(437.8.6±69.2)mm 3, P<0.05]。 结论:FoxO6可通过c-Myc调节p21的表达,进而调控结直肠癌细胞的增殖和侵袭能力。

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作者: 付强 [1] 成静 [2] 张金岱 [1] 张永磊 [1] 陈小兵 [3] 谢建国 [1] 罗素霞 [3]
期刊: 《中华肿瘤杂志》2020年42卷5期 369-375页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3760/cma.j.cn112152-112152-20190118-00017
发布时间: 2020-06-08
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