柱前衍生HPLC法测定大鼠肾组织中羟脯氨酸的含量
Determination of hydroxyproline in rat kidney tissue by HPLC with pre-column derivatization
摘要目的:建立一种测定大鼠肾组织中羟脯氨酸(Hyp)含量的柱前衍生HPLC法.方法:将大鼠肾组织以6 mol · L-1盐酸于110℃水解24 h,加入9-芴甲氧基羰酰氯(FMOC)衍生后,进行HPLC分析.HPLC分析条件为:Phenomenex C18色谱柱(4.60 mm× 150 mm,5(m);流动相:醋酸钠缓冲液( pH3.78)-甲醇-乙腈(梯度洗脱);流速:1.0 ml·min-l;柱温:40C;检测波长:265 nm.结果:羟脯氨酸在浓度范围为15.30~612.00 mg·L-1内线性良好(r =0.9999);回收率为97.4%~103.9%.结论:该方法简单、准确、灵敏,可用于测定大鼠肾组织中羟脯氨酸的含量.
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