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长程缺氧对结肠癌细胞增殖的影响

Effect of long-term exposure to hypoxia on the proliferation of colon cancer cells in vitro

摘要:

目的:体外观察长程缺氧环境对结肠癌细胞SW480和HCT116增殖能力的影响并探讨其可能的作用机制.方法:缺氧培养结肠癌SW480和HCT116细胞14~28 d,采用MTT法和平板克隆法检测缺氧条件下2种结肠癌细胞增殖能力的改变;激光共聚焦显微镜下观察缺氧诱导因子-1 α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和Wnt/β-catenin信号通路关键因子β-catenin的表达;蛋白质印迹法检测HIF-1α和β-catenin、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、Ser9被磷酸化的GSK-3β [phospho-glycogen synthase kinase-3β (Ser9),pGSK-3β (Ser9)]以及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达.以常氧下培养的这2种细胞作为对照.结果:细胞生长曲线和平板克隆检测结果均显示,长程缺氧适应后SW480和HCT116细胞的增殖能力较常氧下明显增强(P<0.01);激光共聚焦显微镜下观察发现,HCT116细胞在缺氧条件下HIF-1α的表达部位发生改变;蛋白质印迹法检测发现,与常氧组比较长程缺氧组细胞中HIF-1α(P<0.05)、β-catenin (P<0.05)和pGSK-3β (Ser9) (P<0.01)蛋白的表达均上调,而总GSK-3β的表达无明显变化,PCNA在缺氧条件下表达上调(与常氧组比较,在SW480细胞中P<0.05,在HCT116细胞中P<0.01).结论:缺氧适应可促进结肠癌细胞SW480和HCT116的增殖,这可能是HIF-1α与Wnt/β-catenin信号转导通路共同作用的结果.

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作者: 杨小丁 [1] 程勇 [1] 贾健锋 [1] 曹先圣 [1] 杨勇 [1]
期刊: 《肿瘤》2013年33卷1期 42-47页 ISTICPKUCSCD
分类号: R735.35
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2013.01.007
发布时间: 2013-03-26
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