实时定量逆转录PCR检测急性髓系白血病患者骨髓细胞BAALC基因表达
Detection of BAALC expression in bone marrow of acute myeloid leukemia patients by real-time quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction
目的:建立实时定量逆转录聚合酶链反应(RQ-PCR)检测急性髓系白血病(AML)骨髓细胞BAALCmRNA的方法,并对24例初诊AML患者骨髓标本进行检测,初步观察其表达及意义.方法:构建BAALC基因转录本的阳性标准品质粒,利用ABI Prism7300型实时定量PCR仪进行检测,BAALC mRNA定量结果以校正比值(NQ)表示,NQ=BAALC mRNA拷贝数/ABL mRNA拷贝数.结果:RQ-PCR实验敏感度为5个拷贝.ABL及BAALC基因CT值的批内差及批间差均<2.26%.FAB各亚型中,M2型BAALC基因高表达率高于M3(P=0.182).结论:建立的RQ-PCR检测AML患者骨髓细胞BAALC mRNA的方法稳定可靠,敏感度高.BAALC基因高表达可能是原发性AML患者一个重要不良预后因素.
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