陆地棉叶绿体铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与表达-论文-万方医学网

陆地棉叶绿体铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与表达

Cloning and Expression of the Chloroplast Copper/Zinc-Superoxide Dismutase Gene in Upland Cotton (Gossypium hirsutum L.)

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摘要：

以陆地棉'CRI36'的叶片为材料,使用RACE技术克隆到了棉花叶绿体Cu/Zn-SOD酶基因.基因序列全长共1 043 bp,含有完整的开放阅读框.推导的氨基酸序列分析显示含有叶绿体信号肽,和已知植物的叶绿体Cu/Zn-SOD酶蛋白的氨基酸残基的同源性在66%～74%之间.基因的表达谱分析显示:棉花叶绿体Cu/Zn-SOD酶基因主要在叶片、茎中表达,根、花和下胚轴中没有检测到信号,即基因的表达主要在棉花的绿色组织.不同生育期的表达谱结果证实:该基因主要在苗期表达,以后表达逐渐减少.用pET-21a(+)构建了原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)的表达结果显示:表达后得到一个29.0 kD的新蛋白,其分子量与预期目标一致.对SOD酶活性的分析证实,重组菌的酶活性显著增加,证明克隆的基因具有活性.

作者：胡根海 ^[1] 喻树迅 ^[2] 范术丽 ^[2] 宋美珍 ^[2]

作者单位：中国农业科学院棉花研究所,河南,安阳,455004;河南科技学院生命科技学院,河南,新乡,453002 ^[1] 中国农业科学院棉花研究所,河南,安阳,455004 ^[2]

期刊：《植物生理与分子生物学学报》2007年33卷3期 197-204页 MEDLINEISTIC

关键词：棉花铜锌超氧化物歧化酶 cDNA末端快速扩增基因表达 cotton Cu/Zn-SOD RACE gene expression

主题词：基因(Genes)铜(Copper)锌(Zinc)超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase)叶绿体(Chloroplasts)

分类号： Q74

栏目名称： 研究报告

DOI： 10.3321/j.issn:1671-3877.2007.03.003

发布时间： 2007-07-23

基金项目：

国家高技术研究发展计划(863计划) 国家重点基础研究发展计划(973计划) 国家重点基础研究发展计划(973计划)

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被引：21
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