农杆菌介导巨桉Eg5高效遗传转化
Agrobacterium-mediated High-efficient Transformation of Eucalyptus grandis Clone Eg5
摘要以巨桉(Eucalyptus grandis)无性系Eg5叶片为外植体,探讨了农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)侵染时间、共培养pH值和共培养时间对瞬时转化效率的影响,分析了不同筛选策略对遗传转化植株筛选效果的影响.结果表明,外植体侵染45分钟,共培养pH值为5.8,共培养3天所得到的瞬时转化效率最高;逐步提高卡那霉素(Km)浓度筛选转基因植株有效,筛选率达到15%,转化率达到0.26%.经过GUS染色分析和PCR检测,证实为转基因植株.
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