hnRPUL1和PARP-1的载体构建
Construction of vectors of hnRPUL1 and PARP-1
目的 构建hnRPUL1和PARP-1的原核和真核表达载体,用以表达这些蛋白和研究其相互作用.方法 用PCR法扩增hnRPUL1的四个片段基因和PARP-1基因,将扩增产物分别和载体pGEX4T3和pcDNA5进行双酶切后回收,连接载体和目的 片段,获得pGEX4T3-hnRPUL1和pcDNA5-hnRPUL1的前、中、后、中后四段重组质粒和pGEX4T3-PARP-1重组质粒.然后转化入大肠杆菌DH5α并进行酶切鉴定和测序.结果 hnRPUL1和PARP-1基因以正确的阅读框架插入pGEX4T3和pcDNA5.结论 成功构建了上述载体并应用于原核和真核表达,为进一步研究其相互作用提供了必要的基础.
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