换一批多索茶碱对脂多糖诱导肺泡上皮细胞炎性损伤及NLRP3/IL-1β通路的影响
Effects of doxofylline on LPS-induced inflammatory injury of alveolar epithelial cells and NLRP3/IL-1 β pathway
摘要目的 探讨多索茶碱对脂多糖诱导肺泡上皮细胞炎症损伤及NOD样受体蛋白3(NLRP3)/白细胞介素-1β(IL-1β)通路的影响.方法 体外培养人肺泡上皮细胞(AEC),将细胞分为对照组(不做处理)、LPS组(10 μg/mL LPS处理)、LPS+低剂量多索茶碱组(10 μg/mL LPS+5 mg/L多索茶碱处理)、LPS+中剂量多索茶碱组(10 μg/mL LPS+10 mg/L多索茶碱处理)、LPS+高剂量多索茶碱组(10 μg/mL LPS+30 mg/L多索茶碱处理).溴脱氧尿苷(BrdU)掺入实验检测细胞增殖比例,流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白印迹(WB)法检测各组细胞的IL-1β、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、NLRP3、凋亡相关斑点蛋白(ASC)、半胱天冬酶-1(caspase-1)蛋白表达,用凝胶电泳迁移率转变分析(EMSA)检测各组细胞核转录因子-κB(NF-κB)活性.结果 与对照组比较,LPS组细胞增殖比例均下降,细胞凋亡率、细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达及NF-κB活性均升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与LPS组比较,LPS+低剂量多索茶碱组、LPS+中剂量多索茶碱组、LPS+高剂量多索茶碱组细胞增殖比例依次升高,细胞凋亡率、细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达及NF-κB活性均依次降低,差异均有统计学意义(P＜0.05),且呈剂量依赖性.结论 多索茶碱可能通过抑制NLRP3/IL-1β通路活化,减轻脂多糖诱导肺泡上皮细胞炎性损伤.
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