换一批MicroRNA-182-5p对高糖诱导内皮细胞损伤的影响
The effect of microRNA-182-5p on high glucose-induced endothelial injury
摘要目的 探讨microRNA-182-5p(miR-182-5p)对高糖诱导的内皮细胞损伤的作用和机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)并随机分为对照组、高糖+mimic对照组、高糖+mimic组、高糖+inhibitor对照组和高糖+inhibitor组.试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)和乳酸脱氢酶(LDH)活性,3-硝基酪氨酸(3-NT)和丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量PCR和免疫印迹检测mRNA和蛋白水平;CCK-8法检测细胞存活率;2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色检测细胞反应活性氧(ROS)水平;TargetScan软件预测结合荧光素酶报告基因检测验证miR-182-5p对SIRT1的3'-非编码区(UTR)调控作用.结果 ①与对照组相比,高糖组内皮细胞miR-182-5p表达明显上调.②高糖条件下,使用miR-182-5p的mimic加重内皮细胞氧化应激和死亡水平,而inhibitor处理则改善高糖诱导的内皮细胞损伤.③高糖条件下,mimic处理降低而inhibitor增加内皮SIRT1蛋白表达,使用SIRT1小干扰RNA阻断inhibitor介导的内皮保护作用.④miR-182-5p直接结合SIRT1的3'-UTR并降低SIRT1表达.结论 miR-182-5p降低SIRT1表达从而加重高糖诱导的内皮细胞氧化应激和死亡,抑制miR-182-5p具有显著的内皮细胞保护作用.
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分类号
R459.9（治疗学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1672-3511.2021.04.009
发布时间
2021-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
武汉市卫生健康委员会青年重点项目（WX19Q15）
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