换一批海栖热袍菌耐高温β-甘露糖苷酶基因的克隆及表达
Cloning and Expression of a β-Mannosidase Gene in Escherichia coli from the Extreme-thermophilic Thermotoga maritima
摘要以海栖热袍菌(Thermotoga maritima)MSB8基因组DNA为模板,克隆得到β-甘露糖苷酶基因(man2).测序分析表明,该基因全序列为2 358 bp,编码785个氨基酸,分子量约为92×103.根据蛋白质氨基酸的同源性分析,该β-甘露糖苷酶与新阿波罗栖热袍菌(Thermotoga neapolitana) Man2(accession No.AAK52304.1)的同源性最大,达到80%.将此基因连接至表达载体pET-28a(+)并转化到大肠杆菌BL21细胞中,经IPTG诱导,β-甘露糖苷酶活力达5.96 U/mL.粗酶的温度稳定性分析表明,该酶的热稳定性好,90 ℃处理10 min,活力回收率65%,具有重要的工业应用前景.
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DOI
10.3321/j.issn:1006-687X.2007.03.018
发布时间
2007-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家高技术研究发展计划（863计划）（NCET-05-0130;2003AA214020）
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