换一批肺炎链球菌SP2108蛋白的原核表达及免疫原性分析
Prokaryotic expression and conservative analysis of SP2108 protein from Streptococcus pneumoniae
摘要目的 制备纯化的肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)SP2108蛋白,分析其在常见S.pn菌株中的保守性,并评价其作为S.pn候选疫苗的可行性.方法 利用PCR法扩增全长SP2108基因,将其克隆至原核表达载体pCold TF中,转化E.coli BL21 (DE3)后IPTG诱导蛋白表达,经Ni-NTA树脂纯化获得高纯度的目的蛋白;将纯化蛋白免疫C57BL/6小鼠制备多克隆抗体,并用间接ELISA检测效价,Western blot鉴定该蛋白在6种常见S.pn菌株的保守性.从Genebank中找出不同S.pn菌株的SP2108蛋白质氨基酸序列,并用ClustalX 2.1软件分析其序列保守性.结果 获得了可溶性形式的SP2108蛋白,该重组蛋白免疫小鼠后可获得高滴度的多克隆抗体;Western blot验证了SP2108蛋白在6株常见S.pn菌株中均有表达;SP2108蛋白在不同型别S.pn中氨基酸序列保守性为100％.结论 原核表达并纯化了SP2108蛋白,该蛋白保守性高,免疫小鼠后可获得高滴度的多克隆抗体,可能是一种较好的S.pn候选蛋白疫苗.
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2016-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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