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摘要目的：研究CTLA4-Ig和抗CD40L单抗早期干预对T细胞活化的作用，探讨阻断CD28-B7、CD40-CD40L共刺激信号通路对自身免疫性心肌炎发生发展的影响及其机制。<br>　　 方法：60只Balb/C雄性小鼠随机分成两组：<br>　　 （1）实验组50只；于实验第1、8天给予皮下注射猪心肌肌球蛋白和CFA混合乳化液诱导制备EAM动物模型，并进一步分5个亚组：EAM对照组、CTLA4-Ig组、抗CD40L单抗组、联合干预组及IgG对照组，每组10只。CTLA4-Ig组、抗CD40L单抗组分别于初次免疫的第1、2、3天按1mg/kg体重小鼠尾静脉注射CTLA4-Ig、抗CD40L单抗，联合干预组等量注射两者混合液，IgG对照组注射等量的小鼠IgG。<br>　　 （2）正常对照组10只；用PBS代替猪心肌肌球蛋白皮下注射。实验第21d眼球采血后留取心脏标本，HE染色观察心肌组织病理变化，血清Tn-I、CK-MB检测反映心肌损伤情况，免疫组化及RQ-PCR检测心肌CTLA4、CD40L及其mRNA的表达，RQ-PCR法检测心肌细胞因子IFN-γ及IL-4 mRNA表达变化，ELISA方法检测血清IFN-γ、IL-4水平。<br>　　 结果：<br>　　 1．动物生存情况 正常对照组皮下免疫过程中死亡1只，其余小鼠全部存活。EAM对照组与IgG对照组小鼠体重生长缓慢，2-3W时甚至出现下降，其他各亚组体重无明显差异。<br>　　 2．心肌组织病理改变 正常小鼠心肌细胞排列整齐，未见炎症细胞浸润。 EAM对照组与IgG对照组小鼠组呈急性心肌炎表现，心肌组织广泛炎症细胞浸润，心肌细胞肥大变性，肌浆溶解断裂，炎症积分明显高于正常对照组（P<0.01）。免疫干预后小鼠心肌炎症浸润明显好转，炎症积分降低，CTLA4-Ig组、抗CD40L单抗组见灶性、局限性炎症细胞浸润，联合干预组仅见散在单个核细胞浸润，心肌炎症积分低于单一干预组（P<0.05），两单一干预组间无明显差异（P>0.05）。<br>　　 3．血清心肌损伤标志物检测 EAM对照组与IgG对照组小鼠血清Tn-I、 CK-MB水平显著高于正常对照组（P<0.01）。免疫干预后，血清Tn-I、CK-MB水平下降，联合干预组较单一干预组下降更为显著（P<0.05），两单一干预组间无明显差异（P>0.05）。<br>　　 4．心肌组织 CTLA4、CD40L及其mRNA表达 免疫组化显示EAM对照组及IgG对照组心肌广泛浸润的单个核细胞胞膜高表达CTLA4、CD40L，RQ-PCR反映其mRNA也显著升高，与正常对照组相比，差异有统计学意义（P<0.01）。免疫干预后，CTLA4、CD40L蛋白及mRNA水平均下降，联合干预组较单一干预组下降更为显著（P<0.05），两单一干预组间无明显差异（P>0.05），CTLA4、CD40L在心肌中的表达强度与炎症积分呈正相关。<br>　　 5．心肌细胞因子IFN-γ、IL-4 mRNA表达 EAM对照组及IgG对照组小鼠，心肌IFN-γmRNA、IL-4 mRNA表达较正常对照组均明显升高(P<0.01)，以Th1细胞因子IFN-γmRNA升高更为显著。两单一干预组Th1细胞因子IFN-γmRNA表达降低，Th2细胞因子IL-4 mRNA表达升高，而联合干预组IFN-γmRNA、IL-4 mRNA均明显受到抑制，二者的表达都降低。<br>　　 6.血清IFN-γ、IL-4水平 EAM对照组及IgG对照组小鼠血清IFN-γ水平较正常对照组明显升高（P<0.01），IL-4水平无明显差异。免疫干预后，各干预组血清IFN-γ水平显著下调，IL-4水平则显著上调。联合干预组IFN-γ水平下降较单一干预组明显，IL-4水平各干预组间差异无统计学意义。<br>　　 结论：<br>　　 1．注射猪心肌肌球蛋白可成功诱导出小鼠实验性自身免疫性心肌炎。<br>　　 2．单一CTLA4-Ig或抗CD40L单抗及二者联合干预，均可减轻心肌炎症浸润，延缓心肌损伤，联合干预较单一干预效果更为显著。