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低密度脂蛋白修饰的蛇床子素N-琥珀酰壳聚糖纳米粒的制备

摘要目的:分离人血浆低密度脂蛋白(LDL),合成N-琥珀酰壳聚糖(Suc-CS)并制备LDL 修饰的蛇床子素N-琥珀酰壳聚糖纳米粒(Ost-LDL-SCS-NPs),考察纳米粒的靶向作用和抗肿瘤效果.方 法:(1)采用溴化钾密度梯度离心法从人血浆中分离LDL,对其粒径分布和形态进行考察;Bradford 法测定蛋白浓度,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对分离提取的LDL 进行纯度鉴定.(2)合成Suc-CS,通过红外光谱、1H-NMR 表征其结构.(3)采用乳化溶剂扩散法制备包载蛇床子素的N-琥珀酰壳聚糖纳米粒(Ost-SCS-NPs),对其进行LDL 修饰制备Ost-LDL-SCS-NPs.测定其粒径分布、包封率和载药量,并考察不同介质中纳米粒的释放特性.(4)以表面过度表达LDL 受体(LDLr)的人源性肝肿瘤细胞株HepG2 为体外肿瘤模型,采用MTT 法研究纳米粒的细胞毒性,初步评价纳米粒的抗肿瘤作用.结 果:(1)分离得到的LDL 平均粒径为(23.4±5.8)nm,PDI 为0.298,透射电镜下观察LDL 的形态为圆整球状;应用Bradford 法测得LDL 蛋白浓度(未经浓缩)为0.808 mg·mL-1;PAGE 结果显示分离得到的LDL 为单一条带,纯度较高.(2)Ost-LDL-SCS-NPs 平均粒径为(144.5±8.64) nm,包封率(78.28±2.06)%,载药量(18.09±0.17)%.体外释放结果表明纳米粒具有较好的缓释作用,其释放符合Higuchi 方程.

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