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摘要心力衰竭作为一类严重的临床病征，其表现为心泵功能衰退的同时，还常常伴随肝、肾、肺等其他靶器官的损伤。心力衰竭时心脏射血分数降低，肾脏血流量减少，肾小球的滤过率随之降低，致使肾脏血流二次分布，最终使肾功能遭到严重损害。肾功能损伤可反作用于心脏，使其衰竭症状进一步加重，影响治疗效果，导致病死率升高。可见，二者相互作用，彼此影响，构成恶性循环，进一步加速心衰的进展。雷米普利(Ramipril,RAM)作为一种高效的血管紧张素转换酶抑制剂(Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitors,ACEI)，是治疗心力衰竭的一线用药，但对于其在肾脏保护方面的具体机制仍众说纷纭，该研究通过检测心衰大鼠肾脏组织细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3及细胞色素C(CytochromeC,Cyt-C)的表达水平，探讨雷米普利可能对心力衰竭大鼠肾脏组织细胞凋亡所产生的影响。<br>　　目的：<br>　　应用肾上腹主动脉缩窄法建造心衰大鼠相关模型。雷米普利干预成功后的模型，采用苏木素-伊红(HE)染色方法查看大鼠的肾脏形态学结构， TUNEL技术分析肾脏组织凋亡情况，免疫组织染色法(SP)和蛋白免疫印迹法测定Bcl-2、Bax、Caspase-3及Cytochrome C蛋白于大鼠肾脏组织内的表达趋势，RT-PCR法对Bcl-2、Bax、Caspase-3及Cytochrome C的mRNA在大鼠肾脏组织内的表达水平进行测定，通过观察雷米普利对心衰大鼠肾脏细胞凋亡及相关凋亡因子的影响，探讨该药对心衰大鼠肾脏组织的可能保护机制。<br>　　方法：<br>　　1取雄性的清洁Wistar大鼠40只，任意选取其中10只大鼠纳入假手术组，其他大鼠均行腹主动脉缩窄操作术。以左心室舒张末压(LVEDP)≥15mmHg为模型构建成功的标准。同时对假手术组大鼠只游离腹主动脉并不结扎。取造模成功的20只大鼠随机分至模型对照组及雷米普利组。<br>　　2每组大鼠均抵达观察终点时，相应大鼠的LVEDP使用多导电生理记测仪监测并精细完整的记录数据。取出大鼠肾脏，进行称量。<br>　　3 HE染色法观察每组实验标本的肾脏细胞形态学变化。<br>　　4 TUNEL技术描述肾脏的组织凋亡概况，统计组织凋亡率(AI)。<br>　　5 SP和Western blot技术分析大鼠肾脏标本内Bcl-2、Bax、Caspase-3及Cyt-C蛋白的表达情况。<br>　　6 RT-PCR技术测定相关大鼠肾脏组织细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3及Cyt-C的mRNA表达水平。<br>　　结果：<br>　　1 LVEDP结果<br>　　假手术组、模型对照组以及雷米普利组大鼠的 LVEDP分别为：(5.52±0.95)mmHg、(19.48±1.68)mmHg和(12.16±1.46)mmHg。模型对照组及雷米普利组大鼠的 LVEDP与假手术组相比较均有所上升(P<0.01)；同模型对照组比较，雷米普利组大鼠的LVEDP明显下降(P<0.01)。<br>　　2 HE染色观察实验对象肾脏组织的病理形态学改变<br>　　假手术组大鼠肾脏细胞外象正常，分布规整、紧致，结构明朗；模型对照组肾小管结构较混乱，上皮细胞分布散乱、模糊，管腔扩大；雷米普利组肾小管结构亦出现少许混乱，上皮细胞分布稀疏、模糊，但未见管腔扩张。<br>　　3每组大鼠的肾脏细胞凋亡指数(AI)结果显示<br>　　假手术组、模型对照组、雷米普利组大鼠的 AI结果分别是(2.51±0.97)%、(40.79±1.31)%和(19.89±1.24)%。模型对照组及雷米普利组大鼠与假手术组大鼠的AI比较均有所增高(P<0.01)，与模型对照组比较，雷米普利组AI明显降低(P<0.01)。<br>　　4免疫组织化学染色法分析每实验组对象肾脏组织中Bcl-2及Bax蛋白的表达情况<br>　　Bcl-2蛋白在每组大鼠肾脏细胞中的表达趋势为：假手术组明显表达：镜下显示胞内含有较多暗棕黄色物质，模型对照组少量表达，雷米普利组则可见中等程度表达，表达量明显少于假手术组，同时高于模型对照组。Bax蛋白表达结果则显示：假手术组大鼠肾脏细胞内无明显暗棕色物质；模型对照组大鼠相关细胞内则有明显暗棕色物质表达，雷米普利组可见中等量暗棕色物质表达。<br>　　5蛋白免疫印迹法测定每组大鼠肾脏组织中Caspase-3及Cyt-C蛋白的表达情况<br>　　与假手术组比较，后两组Caspase-3及Cyt-C蛋白的显现水平均显著增高(P<0.01)，与模型对照组相比，雷米普利组Caspase-3及Cyt-C蛋白的显现则显著降低(P<0.01)。<br>　　6 RT-PCR法估测每组实验大鼠中Bcl-2、Bax、Caspase-3及Cyt-C的mRNA在肾脏组织内的表达水平<br>　　同假手术组相比，模型对照组大鼠中 Bax、Caspase-3及 Cyt-C的mRNA表达均有不同程度提升(P<0.01)，Bcl-2的mRNA表达则有所下降(P<0.01)；雷米普利组大鼠中Bax、Caspase-3及Cyt-C的mRNA表达较模型对照组显著降低(P<0.01)，Bcl-2的mRNA表达则显著增高。<br>　　结论：<br>　　1心力衰竭大鼠肾脏的损伤同细胞凋亡的发生联系密切。<br>　　2雷米普利能够有效抑制心力衰竭大鼠肾组织细胞凋亡，其机制可能与调控Bcl-2、Bax、Caspase-3及Cyt-C的表达，进而阻断线粒体途径有关。