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摘要白桦酸类化合物是一类羽扇豆烷型五环三萜类化合物，主要存在于白桦树皮和叶中，包括桦木醇、桦木酮酸、桦木酸等。现代研究表明，白桦酸类化合物具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌、抗病毒、降血脂、保肝利胆等多种药理作用。由于白桦酸类化合物具有抑制肿瘤细胞生长的作用，并显示出与以往药物不同的作用机制，是潜在的抗肿瘤药物，因此，一直备受国内外学者的关注。但白桦酸类化合物存在的药效不强、溶解性差导致生物利用度低等问题是影响其临床应用的主要因素，为解决上述问题而对白桦酸类化合物开展结构修饰研究成为国内外研究的热点。<br>　　NO作为生物信使或效应分子在人体内发挥着重要的生理作用，且其体内水平异常与多种疾病的发生和发展密切相关。在哺乳动物细胞内，高浓度的NO可作为细胞毒性效应分子介导细胞凋亡，NO通过修饰细胞内各种的信号转导分子而改变了自噬与凋亡细胞的功能，它还对调节凋亡的癌基因p53有调控作用。而对已有的药物进行NO供体修饰以形成NO供体型药物，不少药物能产生良好的抗肿瘤效果且能降低药物的毒副作用，最成功的是对NO供体型非甾体抗炎药的研发，目前已进入临床研究阶段。本课题选用白桦酸类化合物作为新型抗肿瘤药物开发的先导化合物，与有机硝酸酯偶联形成NO供体型白桦酸类衍生物，并对其NO体外释放量及抗肿瘤活性进行研究，研究结果如下：<br>　　1．以白桦酸类化合物结构母核为模板，设计合成 NO供体型白桦酸类化合物，并对其进行了结构鉴定。针对桦木醇C-3、C-28位进行合成设计，通过酯化或氧化反应在桦木醇母核中引入羧基，构造连接NO供体的基团，再采用亲核取代、硝酯化合成了六个化合物，分别是：桦木酮酸-2-硝氧基乙酯、桦木酮酸-3-硝氧基丙酯、桦木酮酸-4-硝氧基丁酯、3,28-二-[4-（3-硝氧基丙氧基)-1,4-丁二酰基]-氧基-桦木醇和3,28-二-[4-（3-硝氧基丙氧基)-1,4-顺丁烯二酰基]-氧基-桦木醇；另对桦木醇直接进行硝酸酯化获得20-氰基-20-羟基-3,28-二硝氧基桦木醇，所有目标产物经硅胶柱层析梯度洗脱纯化，产物结构经红外、核磁共振、液-质联用等技术鉴定。所建立的合成方法简便、可行、实际操作性强。<br>　　2.采用亚硝酸盐-硝酸盐法，测定了NO供体型白桦酸类衍生物的体外NO释放量。实验根据亚硝酸根离子 NO2－能够与格里斯（Griess）试剂发生重氮化、偶合反应，生成玫红色产物，在570nm波长处测其吸收度值，从而间接测定一氧化氮释放量。NO供体型白桦酸类衍生物在2h内释放一氧化氮明显，80min后释放趋于平缓。桦木酮酸-2-硝氧基乙酯、桦木酮酸-3-硝氧基丙酯、桦木酮酸-4-硝氧基丁酯、20-氰基-20-羟基-3,28-二硝氧基桦木醇、3,28-二-[4-（3-硝氧基丙氧基)-1,4-丁二酰基]-氧基-桦木醇所能释放的NO量有显著差异，其Cmax分别为0.3678 mol/L、0.2831 mol/L、0.2726 mol/L、0.1416 mol/L和0.2192mol/L。这五个化合物的NO释放量顺序是桦木酮酸-2-硝氧基丙酯>桦木酮酸-3-硝氧基乙酯>桦木酮酸-4-硝氧基丁酯>3,28-二-[4-（3-硝氧基丙氧基)-1,4-丁二酰基]-氧基-桦木醇>20-氰基-20-羟基-3,28-二硝氧基桦木醇。而在桦木酮酸-2-硝氧基乙酯、桦木酮酸-3-硝氧基丙酯、桦木酮酸-4-硝氧基丁酯这一系列三个化合物，随着碳链的增长，NO释放量逐渐降低。<br>　　3.选用大鼠脑胶质瘤C6细胞作为药物作用的靶细胞，采用MTT法检测NO供体型白桦酸类衍生物体外抗肿瘤活性。实验结果为，在大鼠脑胶质瘤C6细胞系中， NO供体型白桦酸类衍生物在10μmol/L到100μmol/L之间对大鼠脑胶质瘤C6细胞有一定程度的抑制作用，NO供体的引入可增强母体药物对大鼠脑胶质瘤C6细胞的细胞毒作用，可能与NO的释放有一定的相关性。而3,28-二-[4-（3-硝氧基丙氧基)-1,4-丁二酰基]-氧基-桦木醇和桦木酮酸-3-硝氧基丙酯的抗肿瘤活性表现较为突出，是否与两者结构中共同的基团（3-硝氧基丙氧基）存在相关，其作用机制如何仍有待于进一步的研究。