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摘要背景：<br>　　糖尿病勃起功能障碍（Diabetes Mellitus erectile dysfunction ，DMED）是多因素引发的一系列阴茎血流动力学的病理改变。阴茎海绵体内细胞凋亡及其导致的海绵体平滑肌舒张能力下降是DMED的一个重要外周病理生理机制。实验室前期研究发现，内源性肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha, TNF-α）参与糖尿病阴茎海绵体组织中内皮细胞凋亡，显示内源性TNF-α参与了2型糖尿病大鼠（type 2 diabetes mellitus,T2DM）勃起功能障碍的发病。内源性 TNF-α生成增多是否参与 T2DM 阴茎海绵体组织内皮细胞间质化（Endothelial-to-mesenchymal transition，EndMT）尚未见报道。<br>　　目的：<br>　　本实验的研究目标是:<br>　　1.T2DM阴茎海绵体组织是否出现内皮细胞间质化；<br>　　2.研究内源性TNF-α是否参与了T2DM阴茎海绵体组织内皮细胞间质化；<br>　　3. 研究T2DM大鼠阴茎海绵体内TNF-α参与阴茎海绵体组织内皮细胞间质化可能相关信号分子表达的变化。从而进一步探讨TNF-α参与DMED发生发展的可能机制。<br>　　方法与材料:<br>　　1. 选取40只健康雄性SD大鼠(Sprague dawley，SD)，体重200±20g，随机分为：对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、胰岛素组(INS组)、重组人Ⅱ 型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白组(ETN组)，每组10只。DM组、INS组、ETN组采用高脂喂养联合单次低剂量（ip：35mg/kg）链脲佐霉素（STZ）诱导建立2型糖尿病模型，对照组大鼠给予普通正常饲料饮食和腹腔注射生理盐水，注射STZ 3天后检测空腹血糖，血糖值高于16.7mmol/l确定为糖尿病模型成功，建模成功后随机分为DM组、INS组和ETN组， ETN组通过注射重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白（ETN）在受体水平阻断糖尿病大鼠体内TNF-α的生物效应，用量为：2mg/kg/次，每周注射2次，对照组和DM组注射等量生理盐水。STZ注射后3天，每周检测血糖与体重一次，8周后取阴茎组织。<br>　　2. 制备阴茎组织石蜡切片，通过HE染色法观察大鼠阴茎海绵体组织形态结构的改变；通过Masson三色染色法观察各组大鼠阴茎海绵体平滑肌含量和胶原含量比值的改变；<br>　　3. 通过免疫组化技术检测各组大鼠阴茎海绵体内蛋白血小板-内皮细胞粘附分子（CD31）、钙黏蛋白（VE-cadherin）的定位及表达变化。<br>　　4. 提取阴茎总蛋白，采用蛋白质印迹法相对定量检测各组大鼠阴茎海绵体组织中i型跨膜糖蛋白（CD34）、血管性血友病因子（VWF）、波形蛋白（vimentin）、人成纤维细胞生长因子受体-1（FGFR1）和血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）的蛋白表达变化。<br>　　实验结果：<br>　　1. DM组大鼠阴茎海绵体组织内广泛发生EndMT 与NC组大鼠相比，DM组大鼠阴茎海绵体间隔较多，平滑肌减少胶原增多；阴茎海绵体组织中平滑肌含量与胶原含量面积比明显降低；阴茎海绵体组织中内皮细胞标志物CD31、VE-cadherin、CD34和VWF蛋白水平明显降低；间充质标志物vimentin蛋白水平无显著差异；<br>　　2. 单纯进行降糖治疗，不能有效延缓糖尿病海绵体组织发生EndMT 与DM组大鼠相比， INS组大鼠血窦间隙明显减少，胶原明显增多，不规则海绵体血窦间隙减少，阴茎海绵体组织平滑肌含量显著增高，阴茎海绵体组织中平滑肌与胶原面积比明显高于DM组；与DM组大鼠相比，阴茎海绵体组织中蛋白分子VE-cadherin、CD31和CD34明显升高而蛋白分子vimentin与VWF水平无显著差异；<br>　　3. 单纯阻断TNF-α能有效延缓大鼠阴茎海绵体组织发生EndMT 与DM大鼠相比，ETN组大鼠血窦间隙明显增多，平滑肌增多，平滑肌与胶原面积比值明显增高，同时，阴茎海绵体组织中内皮细胞标志物CD31、VE-cadherin、CD34、VWF和vimentin蛋白分子明显升高；<br>　　4. 单纯阻断TNF-α能有效抑制FGFR1和VEGFR2蛋白表达；单纯进行降糖治疗，能有效抑制FGFR1蛋白表达 与NC组大鼠相比，DM组大鼠阴茎海绵体中FGFR1蛋白分子水平明显升高；ETN干预后，FGFR1和VEGFR2蛋白分子水平明显降低，胰岛素降糖处理也能有效降低FGFR1蛋白表达，但VEGFR2蛋白分子水平无明显差异。<br>　　结论：<br>　　1. 2型糖尿病大鼠阴茎海绵体组织发生内皮细胞间质化；<br>　　2. 内源性TNF-α参与了糖尿病大鼠阴茎海绵体组织发生内皮细胞间质化；<br>　　3. 内源性TNF-α可能是通过FGFR1参与糖尿病大鼠阴茎海绵体组织内皮细胞间质化；<br>　　4. 胰岛素处理可导致糖尿病大鼠阴茎海绵体组织平滑肌增多。