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摘要目的： 通过RNAi技术，体外筛选出针对小鼠酪氨酸酶的有效siRNA，并利用筛选出的优势片段进行C57BL/6小鼠的体内实验，检测体内片段的干扰效率，以此探讨针对小鼠酪氨酸酶的siRNA在体内发挥RNAi作用的可行性，并进一步为酪氨酸酶异常等人类疾病的动物模型制作及该类疾病的预防和治疗奠定基础。 方法： 1.利用针对小鼠酪氨酸酶mRNA的不同干扰片段分别转染小鼠黑色素瘤B16细胞系，同时采用阴性干扰片段转染作为阴性对照，单纯脂质体转染作为空白对照。使用实时荧光定量PCR、酪氨酸酶活性测定和黑色素含量测定三种方法分三个时间点于转染后24小时、48小时、72小时对不同组的细胞干扰结果进行检测。 2.使用实时荧光定量PCR的方法检测该优势片段体内干扰作用的可行性。利用体外筛选出的优势片段siNM_011661_001片段进行C57BL/6小鼠的体内实验，采用不同浓度的针对C57BL/6小鼠酪氨酸酶的优势片段siRNA进行RNAi的体内实验，该实验采用玻璃体腔注射的方法进行。24小时后于基因水平检测该片段对小鼠视网膜酪氨酸酶的干扰效率。 结果： 1.siNM_011661_001、siNM_011661_002、siNM_011661_003三个干扰片段均能在转染后发挥一定的干扰作用，其中siNM_011661_001在转染后发挥的干扰效果最强，在降低酪氨酸酶基因mRNA表达、酶活性、以及黑素含量三方面分别能起到82.81％、64.73％、52.53％的抑制作用。 2.玻璃体腔注射后siNM_011661_001片段后24小时，提取的视网膜mRNA进行检测。结果显示0.65nmol siNM_011661_001处理组与1.3nmolsiNM_011661_001处理组小鼠视网膜酪氨酸酶mRNA较仅用PBS处理过的小鼠的视网膜分别降低25.18％，60.80％。 结论： 针对小鼠酪氨酸酶的siNM_011661_001序列能在转录后水平发挥高效、稳定的基因沉默作用，是发挥RNAi的优势序列。它不仅能够在体外发挥有效的降低B16细胞的mRNA水平，抑制酪氨酸酶的活性及黑色素水平，并能显著降低C57BL/6小鼠视网膜mRNA的水平。从而为黑色素相关的一些疾病的治疗及动物模型的建立提供了一个有效的途径。