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摘要背景和目的：缺氧是由多种原因所致的循环血中氧分压或氧含量下降而导致组织细胞供氧不足的病理状态。而中枢神经系统是机体所有组织器官中对缺氧表现最为敏感的部位,易引起脑细胞水肿、变性、坏死,导致神经系统疾病,且脑损伤的严重程度与缺氧程度密切相关。而对于儿科常见缺氧性疾病如新生儿窒息(Asphyxia of newborn)、新生儿缺氧缺血性脑病(Hypoxic-ischemicencephalopathy,HIE)等,则易导致患儿惊厥、运动不协调或障碍、智力低下、学习记忆能力受损,严重者引起脑瘫甚至死亡,不仅对家庭和社会带来沉重的精神压力,也带来了难以负荷的经济负担。<br>　　 能量代谢障碍是脑组织缺氧后最早发生的病理生理学改变,其后发生的一系列“瀑布样”反应,如氧自由基生成的增加,Ca2+大量内流等,相应引起一氧化氮(Nitric oxide,NO)及钙调蛋白(Calmodulin,CaM)含量的增加,导致神经细胞的变性坏死。而缺氧诱导因子-1a(Hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1a)作为缺氧调节的重要因子,是目前研究比较广泛的在缺氧性脑损伤中通过调节多种靶基因的表达,从而发挥对神经元的保护作用。磷酸肌酸是由磷酸与肌酸组成的高能磷酸化合物,它是高能磷酸基的暂时贮存形式,其分子中存在氮-磷键,水解后可释放高能量,而且能够在高能量转换的细胞中通过ADP-ATP途径补充机体所需能量,因此既可作为-能量缓冲剂,又可以作为细胞内的能量载体。目前,外源性磷酸肌酸钠(Creatine Phosphate Sodium,PCr)作为一种高效低毒的心肌保护药,已经广泛应用于治疗病毒性心肌炎、心力衰竭等疾病,具有较好疗效,并且作为心脏手术中停搏液的附加成分之一,已被英国马丁代尔大药典收集;近年来有研究显示,PCr同时具有保护、修复神经元的作用,有临床资料显示,PCr可以减轻新生儿缺氧缺血性脑病、脑梗死等疾病的脑损伤程度,但是否通过影响某些因子的变化而发挥促进脑损伤修复或抑制脑细胞变性坏死的发生的相关动物实验室资料报导较少。本课题旨在从动物实验的角度初步探讨幼鼠缺氧后脑组织NO、CaM含量、HIF-1a mRNA的表达在磷酸肌酸钠干预下的变化,为该药的临床应用提供实验室支持。<br>　　 材料和方法：<br>　　 1.实验动物和分组将75只SD幼鼠随机分为3组,磷酸肌酸钠治疗组(PCr组)25只,生理盐水模型组(NS组)25只,正常对照组25只,其中PCr组和NS组制作缺氧模型,正常对照组不作缺氧处理。<br>　　 2.药物应用<br>　　 PCr组在幼鼠缺氧前0.5 h、缺氧后即刻、24 h及48 h以1.4 mg/g的剂量腹腔注射PCr,NS组在相同时间点腹腔注射等量的生理盐水。正常对照组不注射任何药物。<br>　　 3.标本采集<br>　　 各组于缺氧后6h各取10只幼鼠,断头取脑,取一半脑组织置于多聚甲醛中固定24 h,作病理切片备用;另一半脑组织置于-80℃冰箱中保存,作HIF-1amRNA表达的相对含量测定:各组于末次腹腔注射药物后各取15只幼鼠,断头取脑、称重,置于-80℃冰箱中保存,作NO、CaM含量测定。<br>　　 4.统计学分析<br>　　 采用SPSS17.0进行分析。标准缺氧耐受时间采用独立样本T检验,NO、CaM含量及HIF-1a mRNA表达的相对含量的组问比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA);LSD-t检验用于各组间的两两比较,以P＜0.05为差异具有统计学意义。<br>　　 结果：<br>　　 1.与NS组(7.15±0.90)相比,PCr组(7.97±0.75)标准耐受时间明显延长,P＜0.05。<br>　　 2.病理学改变:PCr组较NS组神经细胞破坏减少,水肿、坏死明显减轻,炎症细胞浸润较少。<br>　　 3.PCr组[(0.73±0.13)umol/g]的NO含量较正常对照组[(0.55±0.07)umol/g]稍高(P＜0.05),但较NS组[(0.86±0.17)umol/g]有所降低(P＜0.05)。<br>　　 4.PCr组[(41.19±1.13)ng/L]的CaM含量较正常对照组[(39.56±0.86)ng/L]稍高(P＜0.05),但较NS组[(42.04±0.76)ng/L]有所降低(P＜0.05)。<br>　　 5.正常对照组(0.04±0.01)几乎无HIF-1a mRNA表达,NS组(1.09±0.01)表达有所增加(P＜0.01),PCr组(1.00±0.02)较NS组表达增加更为明显(P＜0.05)。<br>　　 结论：外源性PCr可以延长缺氧幼鼠标准缺氧耐受时间,明显减轻缺氧组幼鼠脑组织的病理学改变,显著降低缺氧组幼鼠NO、CaM含量,增加缺氧组幼鼠HIF-1amRNA的表达,从而发挥神经保护作用。<br>