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乙脑病毒PrM/E基因在杆状病毒表达系统中的表达及猪细小病毒VP2基因的克隆

摘要该试验将乙型脑炎病毒的PrM/EcDNA基因的HindⅢ-BglⅡ片段(2.1kb)插入到杆状病毒载体pAcUW31JEV1.以Lipofectin作为共转染试剂,将纯化的pAcUW31JEV1与Bsu36I线性化的杆状病毒AcMNPV·LacZ DNA共转染昆虫细胞sf9,经病毒蚀斑纯化技术和X-gal与中性红双重染色技术,随机挑取了5个白斑并进一步纯化,用间接荧光抗体技术对挑取的5个白斑感染的sf9细胞染色,3个克隆在细胞核和细胞浆内发现特异荧光,2个无特异性荧光.用地高辛标记PrN/EcDNA基因的HindⅢ-BglⅡ片段,制备了核酸探针,用该探针通过斑点杂交技术对5个白斑进行检测.

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