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滋阴抑亢调冲汤对OHSS模型大鼠TNF-α、E2、腹腔毛细血管通透性的影响

摘要目的:观察滋阴抑亢调冲汤对卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)模型大鼠体重、卵巢重量、腹腔毛细血管通透性、血清雌二醇(estradiol,E2)含量、血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)含量及卵巢组织TNF-α蛋白表达的影响,并比较滋阴抑亢调冲汤与吲哚美辛对卵巢过度刺激综合征的治疗效果,进一步探讨滋阴抑亢调冲汤治疗卵巢过度刺激综合征可能的疗效及其作用机制。<br>  方法:选用60只未成熟的22日龄Wistar雌鼠(SPF级),随机分为正常对照组、模型对照组、滋阴抑亢调冲汤组和吲哚美辛组4组,每组15只。正常对照组在第22~26日龄,连续5d经皮下注射生理盐水0.1mL·d-1;其余三组均按照改良的Ujioka方法从第22日龄起连续4d每日皮下注射孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)10IU,于第26日龄,皮下注射人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)100IU,在未成年鼠体内建立OHSS模型。各组均在第26日龄开始灌胃,滋阴抑亢调冲汤组采用中药滋阴抑亢调冲汤灌胃4.25g/(100g·d),吲哚美辛组采用吲哚美辛0.5mg/(100g·d)灌胃,正常对照组、模型对照组用等量生理盐水灌胃1mL·d-1,四组均予以连续灌胃1周。在33日龄时给各组大鼠称重,麻醉大鼠,亚甲蓝0.1ml尾静脉注射,30分钟后从心脏采血,随后处死大鼠,正中剖开腹腔,收集腹腔冲洗液,剖取大鼠卵巢称重,制作卵巢组织病理切片,肉眼、光镜观察卵巢组织形态学改变,检测腹腔冲洗液中亚甲蓝含量,采用放射免疫法检测大鼠血清雌二醇(E2)水平、酶联免疫法(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,免疫组化法检测卵巢组织TNF-α蛋白的表达。<br>  结果:1.用改良的Ujioka方法成功建立OHSS大鼠模型,模型对照组、滋阴抑亢调冲汤组、吲哚美辛组的卵巢较正常对照组均显著增大,表面呈紫褐色,呈多囊性改变,卵巢湿重均较正常对照组重(P<0.01),模型大鼠体内出现腹水,腹腔冲洗液亚甲蓝含量明显高于正常对照组(P<0.01),提示腹腔毛细血管通透性增加,表明OHSS模型成功建立。<br>  2.正常对照组、模型对照组、滋阴抑亢调冲汤组、吲哚美辛组四组大鼠体重比较无统计学差异(P>0.05);滋阴抑亢调冲汤组、吲哚美辛组的卵巢重量较模型对照组均明显下降(P<0.01),滋阴抑亢调冲汤组、吲哚美辛组的卵巢重量比较无统计学差异(P>0.05)。<br>  3.吲哚美辛组、滋阴抑亢调冲汤组大鼠腹腔冲洗液亚甲蓝含量均显著低于模型对照组(P<0.01),滋阴抑亢调冲汤组大鼠腹腔冲洗液亚甲蓝含量明显低于吲哚美辛组(P<0.05),提示滋阴抑亢调冲汤降低腹腔毛细血管通透性方面更优于吲哚美辛。<br>  4.与正常对照组相比,模型对照组、吲哚美辛组、滋阴抑亢调冲汤组大鼠血清E2水平均明显升高(P<0.01);滋阴抑亢调冲汤组、吲哚美辛组大鼠血清E2水平明显低于模型对照组(P<0.01或P<0.05);滋阴抑亢调冲汤组大鼠血清E2水平虽低于吲哚美辛组,但两组相比无统计学意义(P>0.05)。<br>  5.模型对照组血清TNF-α水平、卵巢组织TNF-α蛋白表达均较正常对照组明显升高(P<0.05),吲哚美辛组、滋阴抑亢调冲汤组血清TNF-α水平、卵巢组织TNF-α蛋白表达均低于模型对照组(P<0.05),滋阴抑亢调冲汤组血清TNF-α水平、卵巢组织TNF-α蛋白表达低于吲哚美辛组,但两组相比无统计学意义(P>0.05)。<br>  6.光镜下正常对照组大鼠卵巢可见各个发育阶段的卵泡;模型对照组大鼠卵巢明显肿胀,在卵巢皮质内可见部分发育期卵泡,多发性的卵泡囊肿及黄体囊肿,黄素化明显伴间质水肿;与模型对照组相比,吲哚美辛组、滋阴抑亢调冲汤组大鼠卵巢形态,卵泡囊肿及黄体囊肿数目,均有不同程度的减轻。<br>  结论:1.PMSG联合hCG可成功建立OHSS大鼠模型。<br>  2.滋阴抑亢调冲汤可以减轻OHSS模型大鼠的卵巢重量,改善其卵巢形态学的改变。<br>  3.滋阴抑亢调冲汤疗效确切,可通过降低血清E2、TNF-α含量,下调卵巢组织TNF-α蛋白的表达,改善腹腔毛细血管通透性,减少腹水的生成,减轻OHSS症状,对OHSS发挥治疗作用,这可能是滋阴抑亢调冲汤治疗OHSS的机制之一。

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学位信息:
浙江中医药大学 中医学 中医学;中医内科学(硕士) 2016年
发布时间 2018-01-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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