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以变色酸2R和1,5-二羟基萘为底物的伏安酶联免疫分析新体系的研究

摘要该论文共分为三个部分.第一部分:文献综述;第二部分:以变色酸2R(CT2R)为底物的伏安酶联免疫分析新体系的研究;第三部分:以1,5-二羟基萘(1,5DHN)为底物的伏安酶联免疫分析新体系的研究.该论文的主要内容如下:1.系统的分析了变色酸2R(CT2R)-H<,2>O<,2>-HRP伏安酶联免疫分析体系测定HRP及其标记物的方法.CT2R是一种具有电化学活性的物质,碱性条件下,该物质在滴汞电极上-660 mV(vs.SCE)产品左右产生还原波,加入H<,2>O<,2>和辣根过氧化物酶(HRP)后,该物质被氧化生成具有非电化学活性的物质,导致溶液中游离的CT2R浓度降低,相应还原波波高降低,HRP在一定含量范围内与伏安峰的降低值具有良好的线性关系.通过测定波高的降低值可测定HRP及其标记物,测定游离HRP的线性范围是1.0×10<'-5>~4.0×10<'-3>g/L.对酶催化反应的动力学进行了研究,求出反应的米氏常数K<,m>=1.38×10<'-3>,最大反应速率V<,max>=53.9 nA/min.对CT2R测定植物病毒进行了研究.2.系统的分析了1,5-二羟基萘(1,5-DHN)-H<,2>O<,2>-HRP偶合反应伏安酶联免疫分析体系测定HRP及其标记物的方法.碱性条件下,1,5-DHN在氧气作用下生成具有电化学活性的物质,该氧化产物在滴汞电极上-0.70V(SCE)左右产生还原波(以pH11.3BR缓冲液为测定支持电解质),借助此波可测定HRP及其标记物.测定游离HRP的线性范围是1.0×10<'-7>~4.0×10<'-5>g/L,检测限为7.3×10<'-8>g/L.对酶催化反应的动力学进行了研究,求出反应的米氏常数K<,m>=1.85×10<'-5>mol/L.

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