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摘要本研究用阳离子脂质体转染法首次针对c-mycmRNA的SiRNA表达质粒pSilencer-c-myc转染人肺癌细胞A549，72h后收获细胞，RT-PCR检测结果表明，干扰细胞c-mycmRNA水平降低至40％左右，WesternBlotting分析表明其蛋白水平约降低了70％，说明RNA干扰成功。 　　应用流式细胞术研究c-myc表达水平降低对A549细胞周期的影响。结果表明，与对照细胞相比，RNA干扰72h后G0/G1期细胞比例由51.5±1.7％下降到35.1±1.1％，下降16个百分点，S期细胞由41.3±1.4％上升至55.1±1.6％，提高14个百分点，G2/M期则无明显差异(p＞0.05)，显示针对c-myc的RNA干扰引起S期阻滞。 　　为了探明c-mycRNAi引起S期阻滞的作用途径与机制，分析了细胞周期相关基因的mRNA水平，包括cyclin、CDK和CKI。试验结果显示，干扰72h后，干扰细胞与对照细胞比较：1)细胞周期素cyclinD3、E、A的mRNA水平均出现不同程度的下降(p＜0.05)，分别下降了22±8％、30±2％和45±7％，cyclinD1则无明显变化(p＞0.05)；2)CDK2、CDK4mRNA水平下调(p＜0.05)，分别下降了44±4％、39±4％；3)细胞周期素依赖性抑制因子p21及p27的mRNA水平上升，各提高了36±6％、44±8％。 　　为了探明蛋白水平与mRNA水平的对应关系，运用WesternBlotting，分析了Cyclin及CDK的蛋白水平。结果表明干扰72h后，干扰细胞与对照细胞比较，CyclinD3、E、A，CDK2、4等的mRNA下调直接导致其蛋白水平的下降(p＜0.05)，分别下降42±5％、41±2％、57±5％和56±9％、36±5％。CyclinD1无明显变化(p＞0.05)。