检索历史 清除

摘要杜氏盐藻属绿藻门绿藻纲团藻目，是一种生长在海水或盐湖的嗜盐性浮游单细胞真核绿藻，不具细胞壁，细胞呈梨形或椭圆形，胞内有一个大的杯状叶绿体，有双鞭毛，可以在水中游动。该藻突出优点在于耐盐能力强，抗逆性极佳，可在0.05-5M的盐水中生长，是迄今所发现的最耐盐的生物之一。杜氏盐藻由于其极其耐盐的能力，简单的细胞结构以及便利的培养条件而成为研究盐适应性分子机制的重要模式生物和遗传学研究的良好材料。杜氏盐藻作为宿主表达外源基因，生产有用的外源蛋白，具有繁殖速度快、培养简单、表达产物下游纯化过程简单等优越性。 基因组文库是进行基因组研究的基础工作之一，其主要应用于重要基因的克隆，基因的转录和调控的研究，探索基因的结构和组成，基因组物理图谱的构建及基因组的测序。 随着基因工程技术的迅速发展，人们对生物体基因的结构、功能、表达及其调控机理的研究深入到分子水平，从而使得特定基因片段的分离和获得成为可能。基因组文库是含有某种生物体全部基因的随机片段的重组DNA克隆群体。 通过克隆基因组DNA片段可构建基因组文库，这些DNA片段是由限制性内切酶对高分子质量基因组DNA部分酶切而获得，理论上讲目的基因组中的每一个DNA序列都应在重组克隆文库中按比例呈现，但事实并非如此，相反在基因组文库中，一些DNA序列完全丢失，而另一些序列却被过度呈现。 基因组文库的类型是由其选用的载体所决定的，而在基因组文库构建中影响载体选择的主要因素是目标区域的大小与载体的容量、文库筛选的难易程度、载体的设计是否适合染色体步查、克隆的DNA序列是否容易纯化及回收，以及克隆序列的稳定性问题。在本实验中，以lambda噬菌体为载体，以杜氏盐藻为材料，构建了杜氏盐藻的基因组文库。