换一批
换一批高效包装重组慢病毒及其定量方法的建立
Packaging recombinant lentivirus efficiently and establishing quantifying method for lentivirus
摘要：
目的：高效包装不同启动子的重组慢病毒（ LV ），建立LV 的定量方法。方法采用分子克隆方法获得pFUGW、pTY-EF1α-EGFP及pTY-CMV-EGFP 3种转移质粒，然后采用脂质体法与另两种包装质粒pSPAX2及pMD2．G共同转染293T细胞，制备含有不同启动子的LV。设计针对3’-LTR的探针和引物，建立LV的荧光定量PCR定量方法。结果获得了不同启动子的转移质粒，制备了3种不同启动子的LV，应用荧光定量PCR方法测定制备的病毒，载量能达到109 copies／ml。结论成功构建了不同启动子的转移质粒，获得了三种LV，建立了针对LV的荧光定量PCR方法，为后续研究不同启动子在多种细胞系中驱动目的蛋白的表达奠定了基础。
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作者：
作者单位：
南方医科大学生物技术学院输血医学系, 广州,510515
[1]
山东省潍坊市临朐县中医院骨外科, 潍坊,262600
[2]
广州军区疾病预防控制中心, 广州,510515
[3]
公共卫生与热带医学学院三级生物安全实验室
[4]
分类号：
R346
DOI：
10.16485/j.issn.2095-7858.2015.01.001
发布时间：
2015-03-25
基金项目：
国家自然科学基金资助项目
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