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TGF-β1诱导的肿瘤细胞CSRNP1/AXUD1基因的表达及转录调节机制

AXIN1-related CSRNP1 mRNA expression and its transcriptional regulation in TGF-β1-induced tumor cells

摘要:

目的 探讨TGF-β1诱导的肿瘤细胞中CSRNP1/AXUD1基因的表达及其调控机制.方法 分别用不同浓度的TGF-βl或相同浓度下不同处理时间处理指数生长期的人肺腺癌细胞A549和人前列腺癌细胞PC-3,荧光定量RT-PCR检测TGF-β1对两种肿瘤细胞中半胱氨酸-丝氨酸蛋白(cystein-serine-rich nuclear protein,CSRNP1)基因表达的剂量和时间依赖性效应;培养的A549细胞血清饥饿后,分别在有无TGF-β1 (20 ng/ml)和环己亚胺(30 μg/ml)作用下处理24h,检测TGF-β1诱导的CSRNP1基因的表达是否需要新蛋白的合成;最后,分别将SMAD3表达质粒flag-SMAD3和显性失活突变体表达质粒(flag-SMAD3-mu转染A549细胞中,并以空质粒pcDNA3.1作为对照.血清饥饿后,进行有无TGF-β1 (20 ng/ml)处理24h,Western blot确定外源性SMAD3的过表达,荧光定量RT-PCR检测SMAD3的过表达对TGF-β1诱导的CSRNP1基因表达的影响.结果 TGF-β1以浓度和时间依赖的方式诱导肿瘤细胞中CSRNP1基因的表达,并需要新的蛋白合成.SMAD3的过表达增加TGF-β1诱导的CSRNP1的表达,而显性失活的SMAD3突变体(SMAD3-mu)的过表达则显著降低TGF-β1诱导的CSRNP1的表达.结论 肿瘤细胞中TGF-β1可能通过激活SMAD3及其下游信号通路而诱导CSRNP1基因的表达.

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作者: 邓凡 [1] 李松玉 [1] 许万福 [1] 邹志鹏 [1] 柯志勇 [1] 曾方银 [2]
期刊: 《南方医科大学学报》2013年33卷8期 1122-1126页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
栏目名称: 基础研究
DOI: 10.3969/j.issn.1673-4254.2013.08.05
发布时间: 2013-09-16
基金项目:
国家自然科学基金(30973014,81272852)Supposed by National Natural Science Foundation of China
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