换一批
换一批HIF-1αsiRNA重组腺病毒对缺氧肺微血管内皮细胞HIF-1αt和ET-1表达的影响
The effect of HIF-1αsiRNA recombinant adenovirus on the expression of HIF-1αand ET-1 in hypoxia-cultured rat lung microvascular endothelial cells
摘要：
目的 研究缺氧诱导因子-1αsiRNA重组腺病毒(Ad/siHIF-1α)对缺氧肺微血管内皮细胞(RPMVECs)HIF-1α及其下游基因ET-1表达的影响.方法 原代培养肺微血管内皮细胞(RPMVECs);应用HEK293细胞大量扩增Ad/siHIF-1α.将RPMVECs分6组:A组(正常对照:常氧下5%CO2、95%空气、37℃培养);B组(含100 μmol/L COCl2培养基培养4 h);C组(Ad/siHIF-1α感染24 h后,加入COCl2培养4 h);D组(Ad/siHIF-1α感染48 h后,加入COCl2培养4 h);E组(Ad/siHIF-1α感染72 h后,加入COCl2继续培养4 h);F组(单纯腺病毒感染72 h后,加入COCl2培养4 h).采用荧光定量PCR法检测HIF-1α和ET-1mRNA表达;Western blotting法检测HIF-1α蛋白表达;ELISA法检测ET-1蛋白表达.结果 与B组比较,C、D及E组HIF-1αmRNA、HIF-1α蛋白表达显著下调,差异有显著性(均P<0.05);与B组比较,C、D及E组ET-1 mRNA、ET-1蛋白也相应下调,差异有显著性(均P<0.05).结论 Ad/siHIF-1α能够有效沉默缺氧诱导的大鼠肺血管内皮细胞HIF-1α基因,继而影响其下游ET-1基因的表达,为下一步在动物体内研究HIF-1α及其下游基因ET-1在新生儿肺出血发病机制中发挥作用.
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作者：
作者单位：
广东省广州市妇女儿童医疗中心、广州市儿童医院新生儿科,510120
[1]
广东省深圳市儿童医院新生儿科,518026
[2]
期刊：
《广东医学》2009年30卷8期 1046-1048页
ISTIC
分类号：
R3
栏目名称：
基础研究
DOI：
10.3969/j.issn.1001-9448.2009.08.011
发布时间：
2009-09-24
基金项目：
广东省医学科学研究基金
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