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FLAG Pull-down技术筛选LASP-1相互作用蛋白

Screening of interacting proteins of LASP-1 using FLAG Pull-down technique

摘要:

目的 筛选与LASP-1蛋白发生相互作用的蛋白质.方法 构建携带FLAG标签的LASP-1融合表达载体,转染人结直肠癌细胞系SW480表达FLAG-LASP-1融合蛋白,用FLAG-M2亲和柱筛选并经SDS-PAGE分析差异条带,切取差异条带酶解进行质谱鉴定.结果 成功构建pcDNA3-FLAG-LASP-1真核表达载体,转染SW480细胞表达FLAG-LASP-1融合蛋白,SDS-PAGE电泳分离得到8个差异蛋白条带,质谱鉴定LASP-1相互作用蛋白78 kDa葡萄糖调控蛋白(GRP78)和热休克同源蛋白71(HSC71).结论 GRP78、HSC71均可能与LASP-1存在相互作用,这将为进一步研究LASP-1的功能和作用机制提供依据.

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作者: 赵亮 [1] 丁彦青 [1]
期刊: 《广东医学》2010年31卷17期 2237-2240页 ISTIC
分类号: R3
DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2010.17.024
发布时间: 2010-10-25
基金项目:
国家自然科学基金资助项目 南方医科大学基础医学院院长基金资助项目
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