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羊脱细胞真皮基质的体内外毒性实验

Toxicity studies in vivo and in vitro for sheep skin acellular dermal matrix

摘要:

目的:利用溶血反应、热原反应和细胞毒性反应实验了解羊脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)在动物体内外的毒性反应强度.方法:溶血反应:分别制作交联型和非交联型羊ADM的浸提液,为交联组和非交联组;并设置阳性对照组10mL灭菌注射用水,阴性对照组10 mL 0.9%氯化钠溶液.将新鲜抗凝稀释兔血加入实验组和对照组试管中,离心后取上清液测量吸光度值,计算溶血度.热原实验:按照条件入选16只新西兰兔,分为初试A,B两组各3只和复试C,D两组各5只.分别将交联与未交联的两种ADM浸提液注射人两组新西兰兔体内,注射后每隔0.5 h测量一次体温,共测量6次,以6次中最高一次减去正常体温即为该兔的体温升高度数.据此判断是否符合生物制品热原实验的评价标准.MTT实验:收集对数期的小鼠成纤维细胞细胞,种植于含有不同浓度羊ADM浸提液的培养基,测量吸光度值进行细胞活力测定.结果:实验A,B组溶血度均小于5%,热原反应测得新西兰兔体温升高之和低于1.8℃.MTT实验显示10%~90%羊ADM浸提液培养基对体外细胞的毒性为1级,100%的羊浸提液对体外细胞的毒性为2级,交联型与非交联型组的浸提液对体外细胞的毒性的无显著性差异(P>0.05).均对体外细胞的增殖影响轻微.结论:羊DM植入新西兰兔体内引起的溶血反应和热原反应在评价标准之内,在体外对细胞的增殖和活力影响不明显.

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作者: 张军 [1] 黄晓元 [2] 王凌峰 [3]
期刊: 《中南大学学报(医学版)》2016年41卷10期 1069-1074页 MEDLINEISTICPKUCSCD
栏目名称: 论著
DOI: 10.11817/j.issn.1672-7347.2016.10.010
发布时间: 2016-12-05
基金项目:
内蒙古自然科学基金(2008040MS1115).This work was supported by Natural Science Foundation of Inner Mongolia,P.R.China
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