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鸟苷酰环化酶C质粒标准品的构建

Construction of the plasmid DNA of guanylyl cyclase-C

摘要:

目的:制备人鸟苷酰环化酶C(GC-C)质粒标准品,为实时荧光定量PCR检测GC-C含量,探讨大肠癌患者外周血单个核细胞(PBMC)GC-C mRNA表达水平及临床意义奠定基础.方法:在鸟苷酰环化酶C(GC-C)基因高保守区设计特异性的引物和探针,RT-PCR扩增目的片段并连接于pGEM-T载体,以得到GC-C质粒标准品.结果:经过蓝白斑筛选,PCR或EcoR I酶切初步鉴定,阳性克隆测序分析确定GC-C质粒标准品正确性.结论:正确构建GC-C质粒标准品为RFQ-PCR标准曲线的绘制及GC-C的定量检测奠定了基础.

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作者: 王唯一 [1] 毛振彪 [1] 徐政府 [1] 俞智华 [1] 周正斌 [1] 张冬雷 [1]
期刊: 《交通医学》2006年20卷5期 503-504页
分类号: R3
栏目名称: 论著·基础研究
DOI: 10.3969/j.issn.1006-2440.2006.05.007
发布时间: 2006-11-30
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