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定量PCR快速检测炭疽芽孢杆菌的实验研究

Real time quantitative PCR and its reagent product for rapid detection of Bacillus anthracis

摘要:

目的 建立一种简便、快速、定量检测炭疽芽孢杆菌的PCR方法.方法 采用TaqMan荧光探针技术,针对炭疽芽孢杆菌质粒pXO1、pXO2上的基因设计引物;用炭疽芽孢杆菌(Sterne株)污染环境土壤来模拟实际样本,比较了从土壤中提取DNA的不同方法对检测效果的影响,并与同类进口试剂进行了平行比对.结果 以含有检测目的 片段的线性质粒为模板,反应体系的灵敏度可达到101拷贝/μl;用Sterne株芽孢悬液污染土壤,检测灵敏度可达2.5×103cfu/g土壤.我们研制的试剂与进口试剂在敏感性和准确性方面一致,且操作简便. 结论本研究建立的炭疽芽孢杆菌实时定量PCR检测方法可特异、灵敏地检测土壤标本中可疑目标菌.

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