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重组腺病毒介导的肌浆网钙ATP酶在大鼠心肌细胞的过表达

Overexpression of sarcoplasmic reticulum calcium ATPase in isolated rat myocytes mediated by recombinant adenovirus

摘要:

目的:为研究和评估 SERCA2a 在充血性心力衰竭的基因治疗中的价值和 SERCA2a 转基因对心力衰竭病生理的影响.方法:采用重组腺病毒 AdEasy 系统,构建了含SERCA2a cDNA的重组病毒载体 rAd-trSERCA2a.感染培养的乳鼠心肌细胞,以 RTPCR 和Western Blotting检测 SERCA2a在心肌细胞中的表达.结果:经 PCR 法和 Southern 确定目的基因SERCA2a存在于rAd-trSERCA2a基因组中,且连续传代保持其遗传稳定性.感染组心肌细胞SERCA2a蛋白mRNA和蛋白含量分别为对照的4.6倍和1.5倍.结论:我们成功地构建了含 SERCA2a 的重组腺病毒 rAd-trSERCA2a,该病毒可有效介导 SERCA2a 在心肌细胞中的表达.

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