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多房棘球蚴表面抗原EMY162的原核表达及抗体制备

Prokaryotic Expression and Polyclonal Antibody Preparation for Echinococcosis Multilocularis Surface Antigen EMY162

摘要:

目的 建立多房棘球蚴表面抗原EMY162原核表达系统及制备兔多克隆抗体.方法 构建表达载体pCzn1-EMY162并转入Arctic Express菌株,用IPTG诱导、Ni柱纯化获得目的蛋白后免疫新西兰兔,以ELISA、SDS-PAGE考察纯化后抗体的效价、浓度及纯度.结果 酶切鉴定和测序结果表明重组质粒pCzn1-EMY162构建成功,且EMY162在包涵体部位中表达、可溶部位微量表达.通过Ni-NTA柱亲和层析纯化获得高纯度的EMY162蛋白.免疫兔后收集血清,其ELISA结果表明,抗血清可以特异性结合目标蛋白,抗体效价大于512 K,SDS-PAGE结果表明,纯化后获得了较高纯度的多克隆抗体,可用于后续实验研究.结论 成功建立EMY162原核表达系统并制备了高纯度、高效价的多克隆抗体.

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