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CXCR4-PI3KⅢ-自噬轴与结肠癌LoVo细胞转移潜能相关性研究

Relationship of CXCR4-PI3KⅢ-autophagy axis and LoVo cell migration and invasion

摘要:

目的:探讨调控CXCR4-PI3KⅢ-自噬轴对结直肠癌LoVo细胞迁移和侵袭能力的影响.方法:实验分为正常LoVo细胞组、介导CXCR4-RNAi慢病毒转染LoVo细胞组(CXCR4-RNAi组)和无意义慢病毒转染LoVo细胞组(NC组).采用Q-PCR检测PI3KⅢmRNA表达,蛋白质印迹法检测PI3KⅢ、LC3-Ⅱ及Beclin l的表达,激光共聚焦显微镜观察绿色荧光颗粒,透射电镜观察自噬溶酶体,Transwell小室评价LoVo细胞迁移与侵袭能力.结果:PI3KⅢmRNA表达量正常LoVo细胞组为1.09±0.11,NC组为1.07±0.25,CXCR4-RNAi组为0.86±0.06.PI3KⅢ相对表达量CXCR4-RNAi组为0.227±0.023,低于正常LoVo细胞组的0.607±0.012(P<0.001)和NC组的0.667±0.040(P<0.001),正常LoVo细胞组和NC组差异无统计学意义,P=0.310.LC3-Ⅱ相对表达量CXCR4-RNAi组为0.083±0.012,低于正常LoVo细胞组的0.233±0.015(P<0.001)和NC组的0.253±0.020(P<0.001),正常LoVo细胞组和NC组差异无统计学意义,P=0.184.Beclin 1相对表达量CXCR4-RNAi组为0.207±0.012,低于正常LoVo细胞组的0.440±0.053(P=0.134)和NC组的0.650±0.252,P=0.011.绿色荧光颗粒和自噬溶酶体数量正常LoVo细胞组和NC组明显多于CXCR4-RNAi组.CXCR4-RNAi组迁移实验细胞计数(87.7±9.1)低于正常LoVo细胞组的126.3±4.9(P=0.009)和NC组的115.0±18.7(P=0.035).CXCR4-RNAi组侵袭实验细胞计数(88.7±10.5)低于正常LoVo细胞组的109.7±4.7 (P=0.019)和NC组的107.7±8.1,P=0.029.结论:CXCR4 PI3KⅢ自噬轴可调控结肠癌Lo-Vo细胞自噬状态,影响肿瘤细胞迁移和浸润,可能是恶性肿瘤浸润转移的机制之一.

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作者: 王天宝 [1] 石汉平 [1] 韩方海 [1] 董文广 [1]
期刊: 《中华肿瘤防治杂志》2013年20卷23期 1812-1816页 ISTICPKU
分类号: R735.3+4
栏目名称: 实验研究/论著
DOI: 10.3969/j.issn.1673-5269.2013.23.007
发布时间: 2014-03-14
基金项目:
广东省科技计划
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