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人ether-α-go-go钾通道减少肝脏的内质网应激和凋亡

Effect of human ether-α-go-go related gene channels on hepatic endoplasmic reticulum stress and apoptosis

摘要:

目的 研究人ether-α-go-go(human ether-α-go-go related gene,hERG)钾通道在肝细胞中与内质网应激和凋亡的关系.方法 选取雄性20周龄hERG基因敲除(knockout,KO)及同窝野生(wild type,WT)小鼠,测量体质量、摄食量;肝脏石蜡切片HE染色;Western blotting法检测糖异生关键酶葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G6pase)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)在肝脏的表达水平;Western blotting和荧光定量PCR方法检测肝脏凋亡相关基因活化的半胱天冬酶半胱天冬酶3(cleaved-cysteine aspartyl protease 3,cleaved-caspase 3),B细胞淋巴瘤因子2(B-cell lymphoma 2,Bcl2)和Bcl2相关X蛋白(Bcl2 associated X protein,Bax)表达水平;同时检测内质网应激相关基因磷酸化真核细胞翻译起始因子2(phosphorylated-eukaryotic translation initiation factor2α,p-eIF2α)、激活转录因子4(activating transcription factor4,ATF4)以及C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)等基因的表达.经尾静脉给KO小鼠注射hERG慢病毒(lentivirus,LV)后,Western blotting法检测胰岛及肝脏内质网应激和凋亡相关指标.结果 与WT小鼠相比,KO小鼠体质量及摄食量差异无统计学意义,肝细胞轻度肿胀,肝脏糖代谢G6Pase表达水平无明显变化,而PEPCK表达上调提示hERG敲除引起肝脏糖代谢异常.KO小鼠肝脏的内质网应激及凋亡相关指标均上调,提示KO小鼠体内存在内质网应激和凋亡.KO小鼠体内过表达hERG后,改善了小鼠的肝脏内质网应激及凋亡.结论 hERG钾通道可以通过减少肝脏内质网应激和凋亡改善肝细胞内糖代谢.

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作者: 卢晶 [1] 沈涵 [1] 程呈 [1] 刘敬怡 [1] 朱晓蓉 [1] 谢荣荣 [1] 袁明霞 [1] 杨金奎 [1]
分类号: R58Q81
栏目名称: 糖尿病研究从基础到临床
DOI: 10.3969/j.issn.1006-7795.2019.01.009
发布时间: 2019-04-10
基金项目:
国家自然科学基金 北京市属医院科研培育计划 首都医科大学附属北京同仁医院科研基金
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