野生型和C279G突变型UCHL1基因真核表达质粒构建-论文-万方医学网

野生型和C279G突变型UCHL1基因真核表达质粒构建

Construction of Expression System of Wild and C279G Mutant UCHL1

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摘要：

目的构建人野生型和C279G突变型pEGFP-N1-UCHL1质粒.方法采用RT PCR方法从人胚脑组织中扩增出人泛素羧基末端水解酶1(UCHL1)基因,插入至pMD18-T vector中;再采用SOE法定点突变,通过酶切和连接,构建野生型和C279G突变型pEGFP-N1-UCHL1.结果酶切和DNA测序证实,野生型和突变型UCHL1基因分别插入到pEGFP-N1中,野生型UCHL1基因序列与GenBank完全一致,C279G突变型UCHL1基因除第279位碱基C被G替代以外,其余序列与野生型完全一致.结论成功构建野生型和C279G突变型UCHL1基因真核表达质粒.

作者：巴茂文 ^[1] 刘振国 ^[1] 倪培华 ^[2] 陈生弟 ^[1] 李琳 ^[3] 陆国强 ^[1]

作者单位：上海第二医科大学瑞金医院神经内科,帕金森病诊疗与研究中心,上海,200025 ^[1] 上海第二医科大学瑞金医院检验医学中心,上海,200025 ^[2] 新华医院神经内科 ^[3]

期刊：《上海第二医科大学学报》2005年25卷5期 455-458页 ISTICPKUCSCD

关键词：泛素羧基末端水解酶1 pEGFP-N1 定点突变

主题词：突变(Mutation)基因(Genes)质粒(Plasmids)泛素(Ubiquitin)人(Persons)

分类号： R742.5 R363.21

栏目名称： 基础研究

DOI： 10.3969/j.issn.1674-8115.2005.05.007

发布时间： 2005-06-23

基金项目：

国家重点基础研究发展计划(973计划) 上海市科委资助项目

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