野生型和C279G突变型UCHL1基因真核表达质粒构建
Construction of Expression System of Wild and C279G Mutant UCHL1
目的构建人野生型和C279G突变型pEGFP-N1-UCHL1质粒.方法采用RT PCR方法从人胚脑组织中扩增出人泛素羧基末端水解酶1(UCHL1)基因,插入至pMD18-T vector中;再采用SOE法定点突变,通过酶切和连接,构建野生型和C279G突变型pEGFP-N1-UCHL1.结果酶切和DNA测序证实,野生型和突变型UCHL1基因分别插入到pEGFP-N1中,野生型UCHL1基因序列与GenBank完全一致,C279G突变型UCHL1基因除第279位碱基C被G替代以外,其余序列与野生型完全一致.结论成功构建野生型和C279G突变型UCHL1基因真核表达质粒.
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