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组胺对肺动脉内皮细胞一氧化氮合酶基因表达的影响

Effects of histamine on endothelial nitric oxide synthase expression inpulmonary artery endothelial cells

摘要:

本实验研究了组胺对原代培养的肺动脉内皮细胞一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)基因表达的影响及分子机制.采用RT-PCR和免疫印迹技术分别检测mRNA和蛋白质的表达水平,用荧光素酶报告基因实验检测eNOS基因转录起始点上游长1.6-kb的启动子活性,用硝酸还原酶法检测NO的产量.结果发现,组胺增强eNOS表达,呈浓度和时间依赖性,10μmol/L组胺处理肺动脉内皮细胞24 h可使eNOSmRNA和蛋白质的表达达到高峰,eNOSmRNA水平为正常对照组的160.8±12.2%(P<0.05),蛋白质水平为正常对照组的136.2±11.2%(P<0.05).特异性CaMK Ⅱ抑制剂KN-93可抑制组胺的这一效应,表明组胺可通过激活CaMK Ⅱ增强肺动脉内皮细胞eNOS基因的表达.报告基因实验表明,10μmol/L组胺处理24 h后肺动脉内皮细胞eNOS基因启动子的活性增强,为正常对照组的148.2±33.7%(P<0.05).组胺可使肺动脉内皮细胞产生NO增加.这些结果表明组胺在转录水平增强肺动脉内皮细胞eNOS基因的表达,并使细胞产生NO增加,这可能是组胺调节肺血管张力的机制之一.CaMK Ⅱ可能是组胺增强肺动脉内皮细胞eNOS基因表达的途径之一.

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作者: 陆德琴 [1] 李会革 [1] 叶红 [1] 叶仕桥 [1] 金肆 [1] 王迪浔 [1]
期刊: 《生理学报》2004年56卷3期 288-294页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
分类号: Q2
栏目名称: 研究论文
DOI: 10.3321/j.issn:0371-0874.2004.03.003
发布时间: 2004-07-31
基金项目:
国家自然科学基金
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