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血清反应因子参与RhoA诱导的人血管内皮细胞肌动蛋白骨架重构

Serum response factor participates in RhoA-induced endothelial cell F-actin rearrangements

摘要:

为进一步阐明RhoA调控人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)肌动蛋白骨架重构的分子机制,用逆转录病毒感染并筛选出稳定表达持续活化型RhoA(Q63LRhoA)和主导抑制型RhoA(T19NRhoA)的HUVECs.应用免疫组化和Western blot方法分析去血清前后HUVECs血清反应因子(serum response factor,SRF)的表达及定位,Rhodamine-Phalloidine染色观察F-actin动态变化.结果显示,Q63LRhoA组细胞核中SRF表达增加,F-actin重排形成大量应力纤维;T19NRhoA组中SRF表达较弱,F-actin无明显改变,无应力纤维形成.去血清后,正常HUVECs(对照组)和感染细胞中SRF的表达均显著增加,但其亚细胞定位明显不同.对照组去血清培养3 d,SRF主要定位在细胞核,去血清培养5 d,SRF出核转位入细胞浆.Q63LRhoA组SRF发生核滞留,不随去血清培养时间延长发生出核转位现象.T19NRhoA组SRF的表达主要定位于细胞核周.对照组去血清培养3 d,F-actin表达增加,同时形成大量应力纤维,去血清培养5 d,细胞F-actin表达下调,应力纤维解聚.Q63LRhoA组F-actin重构持续发生并形成大量应力纤维,但不随去血清培养时间延长发生明显解聚.而T19NRhoA组F-actin表达不随去血清时间延长而增加.上述结果提示,RhoA介导HUVECs F-actin的重构与SRF的核转位现象密切相关.

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作者: 韩雅玲 [1] 于海波 [1] 闫承慧 [1] 孟子敏 [1] 张效林 [1] 康建 [1] 李少华 [2] 王士雯 [3]
作者单位: 沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科,沈阳,110016 [1] Robert Wood Johnson医学院病理实验科,新泽西州,08854,美国 [2] 解放军总医院老年心血管病研究所,北京,100853 [3]
期刊: 《生理学报》2005年57卷3期 295-302页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
分类号: Q291Q461
栏目名称: 研究论文
发布时间: 2005-08-11
基金项目:
国家重点基础研究发展计划(973计划)
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