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β-淀粉肽(1-40)对海马神经元高电压激活钙电流的作用及银杏内酯B对该作用的影响

Action of β-amyloid peptide1-40 on IHVA and its modulation by ginkgolide B

摘要:

应用全细胞膜片钳技术探讨β-淀粉肽(1-40)(β-amyloid peptide1-40,Aβ1-40)对新鲜分离的大鼠海马CA1区锥体神经元高电压依赖性钙通道电流(high voltage-activated calcium channel current,IHVA)的作用并观察银杏内酯B(ginkgolideB,GB)对该作用的影响.利用细胞外灌流或者电极内液给药的方法,比较加药前后电流幅度的变化以判断药物是否发挥作用.细胞外给予老化处理的Aβ1-40可以浓度依赖性地增强IHVA的幅度,Aβ1-40的浓度为0.01~30 μmol/L时可分别使IHVA幅度增加(5.43±3.01)%(n=8,P>0.05)、(10.49±4.13)%(n=11,P>0.05)、(40.69±8.01)%(n=16,P<0.01)、(58.32±4.85)%(n=12,P<0.01)和(75.45±5.81)%(n=6,P<0.01);新鲜配制的Aβ1-40对IHVA几乎没有影响(n=5,P>0.05).L-型钙通道阻断剂nifedipine可以抵消Aβ1-40对IHVA的增强作用.Aβ1-40(1.0μmol/L)对IHVA的增强作用可以被cAMP的类似物8-Br-cAMP和腺苷酸环化酶(adenylyl cyclase,AC)的激动剂forskolin增强[分别为(66.19±5.74)%,P<0.05和(73.21±6.90)%,P<0.05],被蛋白激酶A(protein kinaseA,PKA)的抑制剂H-89减弱[(20.08±2.18)%,P<0.05].GB可有效地减弱Aβ1-40对IHVA的增强作用.以上结果表明Aβ1-40可通过AC-cAMP-PKA增强IHVA引起胞内钙超载,这可能是其产生神经毒性作用的机制之一.GB可通过抑制Aβ1-40引起的异常钙离子内流对神经元起一定保护作用.

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