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香烟提取物活化大鼠支气管平滑肌细胞蛋白激酶C亚型及下调钾通道BKCa、Kv1.5表达

Cigarette smoke extract activates PKC isoforms and down-regulates the expressions of potassium channels BKCa and Kv1.5 in rat bronchial smooth muscle cells

摘要:

大电导的钙活化钾通道(large-conductance calcium-activated potassium channel,BKCa)和电压依赖性钾通道Kv1.5在气道高反应性的发牛机制中具有重要作用.已知吸烟可致气道高反应,但钾通道的变化在其发病中的作用尚需进一步阐明.本文旨在研究香烟提取物(cigarette smoke extract,CSE)对培养的大鼠支气管半滑肌细胞(bronchial smooth muscle cels,BSMCs)钾通道BKCa和Kv1.5表达的直接作用,以及蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)在其中的作用.实验采用原代培养人鼠BSMCs,用5%CSE刺激,免疫印迹检测PKC亚型的表达和转位,半定量RT-PCR、免疫印EIJ迹实验检测BKca和Kv1.5的mRNA和蛋白表达,然后用PKC抑制剂BIM和G6e6983与CSE共作用,检测其对BKCa 和Kv1.5的mRNA和蛋门表达的影响.结果显示,5% CSE使PKCε、η、θ发生明显的膜转位,并使BKCa和Kv1.5的蛋白和mRNA表达明显降低;选择性PKC抑制剂BIM或Goe6983与CSE共同作用,均可使BKCa和Kv1.5的蛋白和mRNA表达部分恢复.上述结果提示,CSE可引起BSMCs的BKCa和Kv1.5表达下调,PKC£、T1、ε、η、θ参与其信号转导.

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