尿儿茶酚胺 LC-MS/MS 检测方法的建立
Establishment of a LC-MS/MS for the determination of urinary catecholamines
目的:建立尿液儿茶酚胺[包括肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)]的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法。方法以 E-d3、NE-d6和 DA-d4盐酸盐为内标,采用 WATERS ACQUITY UPLC? HSS T3色谱柱(2.1 mm ×100 mm,1.8μm)进行分离。流动相 A1为2‰甲酸水溶液,流动相 B1为甲醇(纯度为99.9%),流速为0.5 mL/min,按 A1∶B1=95∶5等度洗脱。采用电喷雾(ESI)正离子模式进行质谱分析。对方法的线性、准确度(回收率)、不精密度及最低检出限等进行性能验证。选取表面健康人群65名,建立 E、NE 和 DA 的参考区间。结果采用建立的 LC-MS/MS 检测尿液 E、NE 和 DA,保留时间分别为0.58、0.89和0.63 min,检测范围为0.50~800.00 ng/mL。 E、NE 和 DA 的加标平均回收率分别为97.95%、97.78%和101.03%,最低检出限分别为0.25、2.50和2.50 ng/mL。 E、NE 和 DA 的参考区间分别为5.4~25.8、28.5~73.1和269.1~420.5μg/24 h。结论建立的LC-MS/MS 方法能同时检测尿液中的 E、NE 和 DA,可为嗜铬细胞瘤的诊断提供可靠的信息。
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