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大肠杆菌hfq和rne-710基因的双质粒无痕敲除技术

Two-plasmid scarless genetic modification in Escherichia coli hfq and rne-710

摘要:

基因敲除技术是了解基因功能的重要技术手段.以大肠杆菌K-12MG1655基因组 hfq (309 bp) 和rne-710 (1056 bp)基因为模型,首先构建Δhfq∷Spe和Δ rne-710∷Spe菌株, 通过融合PCR方法分别构建缺失hfq (309 bp) 和rne-710 (1056 bp)的融合片段并连接至辅助质粒,缺失hfq和rne-710的片段经重组分别替换壮观霉素抗性盒,得到无痕敲除株Δ hfq和Δ rne-710.双质粒无痕敲除和融合PCR方法相结合为大片段基因缺失开辟了新的途径.

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作者: 王净 [1] 吕瑞辰 [2] 韩延平 [2] 杨瑞馥 [2]
期刊: 《生物工程学报》2018年34卷4期 602-612页 MEDLINEISTICPKUCSCD
栏目名称: 生物技术与方法
DOI: 10.13345/j.cjb.170388
发布时间: 2018-08-27
基金项目:
National Basic Research Program of China (973 Program) Science and Technology Program of Hebei Province, China (No. 16236605D-1 (2017)).国家重点基础研究发展计划 (973计划) 河北省科技计划项目 (No. 16236605D-1
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