大肠杆菌hfq和rne-710基因的双质粒无痕敲除技术
Two-plasmid scarless genetic modification in Escherichia coli hfq and rne-710
摘要:
基因敲除技术是了解基因功能的重要技术手段.以大肠杆菌K-12MG1655基因组 hfq (309 bp) 和rne-710 (1056 bp)基因为模型,首先构建Δhfq∷Spe和Δ rne-710∷Spe菌株, 通过融合PCR方法分别构建缺失hfq (309 bp) 和rne-710 (1056 bp)的融合片段并连接至辅助质粒,缺失hfq和rne-710的片段经重组分别替换壮观霉素抗性盒,得到无痕敲除株Δ hfq和Δ rne-710.双质粒无痕敲除和融合PCR方法相结合为大片段基因缺失开辟了新的途径.
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作者:
作者单位:
河北北方学院 动物科技学院,河北 张家口 075131;军事医学科学院微生物流行病研究所 病原微生物生物安全国家重点实验室,北京 100071
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军事医学科学院微生物流行病研究所 病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071
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期刊:
《生物工程学报》2018年34卷4期 602-612页
MEDLINEISTICPKUCSCD
关键词:
大肠杆菌hfqrne-710双质粒无痕敲除融合 PCRⅠ-SceⅠ内切酶Escherichia colihfqrne-710two-plasmid scarless genetic modificationfusion PCRendonucleaseⅠ-SceⅠ
栏目名称:
生物技术与方法
DOI:
10.13345/j.cjb.170388
发布时间:
2018-08-27
基金项目:
National Basic Research Program of China (973 Program)
Science and Technology Program of Hebei Province, China (No. 16236605D-1 (2017)).国家重点基础研究发展计划 (973计划)
河北省科技计划项目 (No. 16236605D-1
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- 被引:1
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