摘要篇首:登革病毒(Dengue virus)属黄病毒科黄病毒属,基因组结构为单股正链RNA,全长约10~11kb。登革病毒在复制过程中不形成DNA中间体,因此要在基因水平研究其特征存在一定困难,因为突变、重组、克隆等分子生物学技术都是在DNA水平上的操作。体外转录制备感染性RNA(感染性转录体)技术提供了解决这一难题的新途径[1]。该技术是把病毒RNA逆转录成Cdna,并置于RNA聚合酶启动子的下游,在RNA聚合酶的作用下体外转录出全长正链RNA,经转染易感细胞后复制出子代病毒颗粒。由于这种子代病毒来自Cdna,研究者就可以在DNA水平上进行操作,Cdna重组或突变将通过转录表现在子代病毒的RNA中,从而达到人为改造病毒,研究其复制、表达与致病机理的目的。
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